Page 62 - 《渔业研究》2025年第6期
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第 6 期               金楠霖等: 红尾皇冠鱼源彭氏变形杆菌的分离、鉴定及药敏实验                                      753

                             表 4    药敏实验结果                     畜     ,鸡(Gallus gallus domesticus) 、鸭(Anas
                                                                 [21-26]
               Tab. 4    The results of the antimicrobial susceptibility test  platyrhynchos  domesticus) 等 禽 类 [27-30] , 家 庭 宠
                        药物           抑菌圈直径/mm      敏感性         物猫(Felis catus) [31] ,以及鲫鱼(Carassius aura-
                        Drugs         Inhibition zone  Susceptibility  tus)  [32] 、 对 虾  [33]
                                        diameter                               、 克 氏 原 螯 虾 ( Procambarus
               庆大霉素 Gentamicin          10.5±0.1     I         clarkii) [10] 、蛙类 [34] 、暹罗鳄(Crocodylus siamen-
                                                               sis) [35-36]  等水产养殖品种。鱼类肠道内的微生物
               氯霉素 Chloramphenicol      13.3±0.8     I
                                                               群落通常处于动态平衡状态,与宿主和谐共生                   [37-38] 。
               强力霉素 Doxycycline         10.3±0.3     I
                                                               但当这一平衡被打破时,部分细菌可能转变为致病
               青霉素 Penicillin             0          R
                                                                                             [9]
                                                               菌,导致鱼类发病,引发严重肠炎 。另有研究表
               卡那霉素 Kanamycin           12.1±0.3     I
                                                               明,变形杆菌属致病菌可通过菌毛黏附宿主细胞表
               环丙沙星 Ciprofloxacin       26.4±0.2     S
                                                               面,快速生成鞭毛与多糖荚膜,进而在细胞内大量
               恩诺沙星 Enrofloxacin        24.1±0.5     S         释放毒力因子,最终导致宿主死亡               [39] 。
               诺氟沙星 Norfloxacin         19.8±0.2     I             本研究结果显示,彭氏变形杆菌对体质量
                                                                                                  5
               利福平 Rifampicin           14.2±0.6     I         50 g  左右的红尾皇冠鱼的       LD 为 0  5.16×10  CFU/尾,
                                                                                       5
                                                                                   5
               四环素 Tetracycline         6.0±0.1      R         一般认为     LD <1.0×10  CFU/mL  的菌株为强毒菌
                                                                           50
                                                               株,因此该菌株可被认为是弱毒菌株。本实验中,
               链霉素 Streptomycin         10.1±0.4     I
                                                               回归感染实验设计的空白对照组出现了                   20%  的死
               头孢曲松 Ceftriaxone sodium    0          R
                                                               亡率(表    1) ,可能是由实验过程中存在的操作损
               复方新诺明 Paediatric compound
               sulfamethoxazole tablets  18.6±0.5    S                                    4        组的平行
                                                               伤、应激导致的。此外,5×10  CFU/mL
                注:S. 敏感;I. 中介; R. 耐药。                          ①死亡   2  尾(20%) ,平行②死亡        0  尾,结合实验
                Notes: S. Susceptibility; I. Intermediate resistance; R. Resistance.
                                                               操作流程及鱼体生理状态进行回溯分析,造成差异
               3 讨论                                            的原因可能是:虽然各组均置于相同规格的水族箱
                                                               中,且水温、溶解氧等参数通过仪器实时监控,但
                  本研究从患病红尾皇冠鱼内脏中分离出菌株,                         平行②所在水族箱可能因局部水循环轻微不畅,导
              并依据科赫氏法则证实其致病性。结合                   16S rRNA     致水体中代谢废物(如氨氮、亚硝酸盐)浓度短暂
              基因序列比对、生理生化鉴定及系统发育树分析,                           略高于其他平行组,虽未达到影响鱼体健康的阈
              确定该致病菌株为彭氏变形杆菌,首次证实彭氏变                           值,但可能通过轻微应激刺激增强鱼体的免疫代偿
              形杆菌可感染红尾皇冠鱼并致病。彭氏变形杆菌与                           能力,间接提高了其对病原菌的耐受度。

              普通变形杆菌、奇异变形杆菌、豪氏变形杆菌(P.                              与已有研究相比,普通变形杆菌对赤点石斑鱼
              hauseri)和产黏变形杆菌同属肠杆菌科、变形杆菌                       (Epinephelus akaara)的  LD 为 0  6.7×10  CFU/尾 [40] ,
                                                                                                3
                                                                                       5
              属 [14] 。作为革兰氏阴性菌,该属细菌营养需求较                       其致病力更弱。造成差异的原因可能是注射方式的
              低,在普通琼脂培养基上生长良好,于湿润固体琼                           不同,本研究采用腹腔注射方式感染红尾皇冠鱼,
              脂平板上常出现特征性的“迁徙生长”现象,这种                           而普通变形杆菌感染赤点石斑鱼采用的方式是肌肉
              生长特性可被苯酚或胆盐抑制。在肉汤培养基中,                           注射。腹腔注射时,细菌需先突破腹腔内的巨噬细
              其培养物表现为均匀浑浊并形成菌膜。变形杆菌属                           胞与腹膜屏障,才能进入血液循环,而肌肉注射
              细菌形态多样,兼具球形与丝状形态,具备鞭毛,                           后,细菌可直接通过毛细血管进入血液,感染效率
              无荚膜和芽孢,运动能力活跃              [15] 。这类细菌宿主          更高。本研究药敏实验结果表明,彭氏变形杆菌对
              范围广泛,能够感染无脊椎动物、脊椎动物乃至人                           环丙沙星、恩诺沙星、复方新诺明敏感,这与刘有
              类,属于人畜鱼共患的条件致病菌               [16-17] 。它们广泛      华等  [11] 、黄杰等 [12]  的研究结论一致;而对青霉素
              存在于动物肠道、养殖水体以及腐败有机物中,人                           耐药,符合马亮等        [10] 、刘有华等  [11] 、黄杰等  [12]  的
              类因接触受污染的土壤、水源、垃圾或动物肠道而                           研究结果;但对头孢曲松的耐药性与黄杰等                    [12]  的
              引发食物中毒的案例屡见不鲜             [18-20] 。此外,变形杆        研究存在差异,推测可能源于养殖环境、用药剂量

              菌对多种动物具有致病性,涵盖猪(Sus scrofa                       及方法的不同。值得注意的是,本研究显示彭氏变
              domesticus)、牛(Bos taurus)、羊(Capra hircus)等家      形杆菌对青霉素、头孢曲松等抗生素具耐药性,尽
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