Page 82 - 《渔业研究》2025年第5期
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第 5 期               李培君等: 贝类高致病性溶珊瑚弧菌关键毒力因子的鉴定与分析                                      623

              在菌株   RSH08  中  PSMs 高达  7,显著高于菌株      RSH02     高活性。RSH02      的碱性丝氨酸蛋白酶(PSMs=5)
              (4)和菌株      RSH05(2) ,提示菌株        RSH08  潜在      强于  RSH05(PSMs=2) 。

                          菌株          菌株形态              革兰氏染色            溶血素              CAS

                         Strain     Strain morphology    Gram stain     Hemolysin     Chrome azurol S

                         RSH02
                                                                20 μm


                         RSH05
                                                                20 μm


                         RSH08
                                                                20 μm
                                     A       B              C              D               E
                                        图 1    三株溶珊瑚弧菌的菌落、细胞形态及生化特性表征
                      Fig. 1    Characterization of colony morphology, cellular morphology and biochemical properties of three
                                                    V. corallillyticus strains
                  注:A. 菌株在   2216E  平板上的菌落形态;B. 菌株在     TCBS  平板上的菌落形态;C. 菌株的显微镜照片(比例尺:20 μm) ;
              D. 菌株在血平板上的      β  溶血现象(箭头指示透明溶血环) ;E. 菌株在          CAS  检测平板上的嗜铁素产生能力(箭头指示黄色透
              明圈) 。所有图像均是拍摄于培养         24 h  后的。
                  Notes:  A.  Colony  morphology  of  strains  on  2216E  agar  plates;  B.  Colony  morphology  of  strains  on  TCBS  agar  plates;  C.
              Microscopic images of the strains (scale bar: 20 μm); D. β-hemolysis of strains on blood agar plates (Arrows indicate the transparent
              hemolytic rings); E. Siderophore production ability of strains on CAS assay plates (arrows indicate the orange halos). All images were
              taken after 24 h of incubation.



                            1.2
                            1.1
                            1.0
                            0.9
                            0.8
                            0.7
                          OD 600  0.6                                                      RSH02

                            0.5                                                            RSH05
                            0.4                                                            RSH08
                            0.3
                            0.2
                            0.1
                             0
                                1  2  3  4  5  6  7  8  9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20  21 22 23 24
                                                       培养时间/h
                                                       Culture time
                                            图 2    三株溶珊瑚弧菌的生长曲线(28 ℃)
                                    Fig. 2    Growth curves of three strains of V. coralliilyticus (28 ℃)

               2.4 平板验证                                        白酶选择培养基进行平板验证实验。实验结果如
                  为证实基于蛋白质谱分析所预测的高毒力菌                          图  4  所示,三株高致病菌的         ECPs 在其区域内均产
              株  ECPs 功能活性,本研究进一步采用了特异性蛋                       生了显著的白色、不透明的水解圈。三株高致病菌
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