Page 45 - 《渔业研究》2025年第5期
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586                                  渔  业  研  究                                     第 47 卷

               1.7 数据处理                                            共居感染稀有鮈鲫发病进程较为缓慢,第                    12
                  使用   GraphPad Prism8.0.2  软件进行数据处理与          天才开始出现与腹腔注射组相似的临床症状:游动
              作图。组间差异采用          Student’s two-tailed t 检验进行   迟缓、鳍条和肌肉出血(图             2b) ,于第   14  天进入
              显著性分析,P<0.05       被认为差异具有统计学意义。                 死亡高峰,最终在第         20  天全部死亡(图       3) 。该结
                                                               果表明病毒通过水体进行水平传播时有延迟效应,
               2 结果与分析                                         其可能通过黏膜屏障入侵并诱导稀有鮈鲫死亡。

               2.1 病毒感染实验鱼临床表现与存活率分析                                100
                                                                                                 对照组
                  经过持续     25 d  的鱼体临床症状观察,结果显                                                   Control group
              示,PBS   对照组所有个体未出现任何临床症状,存                                                         注射组
              活率为    100%;病毒注射组实验鱼在感染后第                4  天      存活率/%  Survival rate  50        Infection group
                                                                                                 共居感染组
              开始出现游动迟缓、鳍条及肌肉出血等临床症状                                                              Co-habitation
                                                                                                 infection group
              (图   2a) ,并伴随个体死亡。第           5  天起,发病鱼
              数量急剧增加,体表出血症状加剧,进入死亡高峰                                 0
                                                                            5     10    15     20    25
              期,直至第      8  天全部死亡(图       3) 。该结果表明,                              时间/d Time
              腹腔注射     GCRV-Ⅱ可引发稀有鮈鲫急性、致死性                     图 3    腹腔注射和共居感染稀有鮈鲫存活率比较(n=50)
              感染。病毒可能通过腹腔注射的方式感染机体,短                            Fig. 3    Comparison of survival rate of G. rarus groups
              期内病毒快速复制导致稀有鮈鲫死亡。                                        infected by intraperitoneal injection or

                                                                             co-habitation (n=50)
                a)                   b)
                                                                2.2 病毒载量与宿主免疫应答分析
                                                                   不同组织中的病毒        Vp5  载量及宿主    Mx1  基因的
                                                               相对表达水平如图        4  所示。腹腔注射后,病毒迅速
                                                               扩散到多个靶器官并能够进行有效增殖,进而引发全
                                                               身性感染。鳃组织中         Vp5  拷贝数极显著高于脾脏和
                                                               肠道(P<0.01) (图    4a) ,表明该病毒对鳃组织具有
                     图 2    稀有鮈鲫感染  GCRV-Ⅱ后临床症状                很强的嗜性,可能是其侵染的主要靶器官;脾脏中
                          (a. 注射组;b. 共居感染组)                    VP5  相对表达量在     3  个组织中最低;鳃、脾脏和肠
               Fig. 2    Clinical symptoms of G. rarus following infection  道中  Mx1  基因表达均极显著上调(P<0.01)(图  4b);
               with GCRV-Ⅱ (a. Injection group; b. co-habitation group)
                                                               在  3  个组织中,脾脏中      Mx1  基因上调水平最高。


                                        **
                                                                         **
                      a)  3.0×10 5   **              b)   20                              对照组
                                                                                          Control group
                       Vp5 RNA 拷贝数/(个/g)  Vp5 RNA copies  2.0×10 5 5 4  **  相对于 Mx1 的表达量 Relative expression of Mx1  10  **
                                                                                          注射组
                          2.5×10
                                                                **
                              5
                                                          15
                                                                                          Infection group
                           1×10
                           8×10
                           6×10
                           4×10
                           2×10 4 4 4                     5
                              0                           0
                                  鳃    脾脏    后肠                 鳃       脾脏       后肠
                                  Gill  Spleen  Hindgut         Gill    Spleen  Hindgut
                                       组织                               组织
                                      Tissuses                         Tissuses
                         图 4    稀有鮈鲫腹腔注射感染      GCRV-Ⅱ后  Vp5 RNA  拷贝数(a)和   Mx1  的相对表达水平(b)
                      Fig. 4    Vp5 RNA copies (a) and relative expression level of Mx1 (b) in G. rarus injected with GCRV-Ⅱ
                                                   by intraperitoneal injection
                  注:**表示组间差异极显著,P<0.01。
                  Notes: ** means there’s extremely significant difference between groups, P<0.01.
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