Page 37 - 《水产学报》2026年第01期
P. 37

文章编号: 1000-0615(2026)01-019103-17                                            , 2026, 50(1): 019103





                                              JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA

                                                 DOI: 10.11964/jfc.20250214885

              严孟芝, 王丹丹, 杨静, 等. 大口黑鲈       IL-12  表达分析及异构体组成形式鉴定 [J]. 水产学报, 2026, 50(1): 019103.
              Yan M Z, Wang D D, Yang J, et al. Characterizing IL-12 expression and identifying its isoform profiles in largemouth bass
              (Micropterus salmoides) [J]. Journal of Fisheries of China, 2026, 50(1): 019103 (in Chinese).


                         大口黑鲈          IL-12    表达分析及异构体组成形式鉴定



                                1,2
                                               1,2
                                                                                           1,2
                                                              1,2
                                                                            1,2
                        严孟芝 ，  王丹丹 ，  杨    静 ，  黎    洁 ，  曾    辉 ，
                                               张永安 ，  周    洋           1,2*
                                                        1,2*
                                         (1. 华中农业大学水产学院，湖北 武汉 430070；
                     2. 华中农业大学，长江经济带大宗水生生物产业绿色发展教育部工程研究中心，湖北 武汉 430070)

                   摘要： 【目的】为探究大口黑鲈白细胞介素                  12 (IL-12) 异构体的组成形式和功能特征。 【方法】
                   克隆大口黑鲈       IL-12  亚基基因全长      cDNA  序列，通过多序列比对分析蛋白序列保守结构；
                   qPCR  方法检测大口黑鲈         IL-12  组织表达谱；基于时间序列转录组测序解析不同                       IL-12  亚基
                   基因在感染鰤鱼诺卡氏菌后的表达变化；通过                        Co-IP  实验在真核细胞内验证           IL-12  亚基间
                   的相互作用；体内过表达             IL-12  融合蛋白并检测脾脏中          IFN-γ 基因的表达变化。 【结果】成
                   功克隆大口黑鲈        4  个  IL-12  亚基基因  p35a、p40a、p40b    和  p40c，多序列比对结果表明，4
                   个亚基中存在多个参与二硫键形成的保守半胱氨酸位点。qPCR                               显示  4  个亚基在肝脏、脾
                   脏、头肾等      6  个组织中存在差异表达。转录组结果表明，p40c 基因在头肾和脾脏中均呈持
                   续抑制现象，p40b       基因在头肾中持续抑制，而在脾脏中感染第                      2  天上调后逐步回落，p35a、
                   p40a  和  p40b  在头肾和脾脏中表达模式不同。Co-IP              实验证实大口黑鲈          p35a 与  p40b、p40c
                   存在稳定的相互作用。体内过表达由                   GS linker 串联的  p40b+p35a 和  p40c+p35a 均能显著上
                   调脾脏中     IFN-γ 表达水平。 【结论】IL-12        亚基在健康组织中广泛分布，在鰤鱼诺卡氏菌感
                   染后，p40    基因均出现表达受抑制现象。结构分析揭示大口黑鲈                            IL-12  亚基与哺乳动物高
                   度保守，且      p35a 亚基分别与      p40b  和  p40c 发生稳定相互作用。p40b-p35a 和         p40c-p35a 的体
                   内过表达可显著诱导脾脏             IFN-γ 上调，证明了大口黑鲈            IL-12  异构体具有与哺乳动物保守
                   的  Th1  型免疫激活功能。本研究揭示了大口黑鲈                    IL-12  亚基  p35a、p40a、p40b   和  p40c 的
                   分子特征，并证实大口黑鲈              IL-12  异构体的多样性及免疫调控功能，为鱼类                     IL-12  免疫调
                   控机制研究提供新资料。
                   关键词: 大口黑鲈；白细胞介素              12；异构体；鰤鱼诺卡氏菌
                   中图分类号: S 917.4                              文献标志码: A


                   白细胞介素      12 (IL-12) 亦称自然杀伤细胞刺             (CLMF) ，主要由活化的树突状细胞、单核-巨噬
                                                                      [1]
              激 因 子   (NKSF) 和 细 胞 毒 性 淋 巴 细 胞 成 熟 因 子         细胞以及其他抗原递呈细胞产生                 [2-3] 。IL-12  在免



              收稿日期：2025-02-21        修回日期：2025-05-25
              资助项目：国家重点研发计划        (2023YFD2400701)；现代农业产业技术体系专项   (CARS-46)
              第一作者：严孟芝，从事水生动物病原菌生物防控研究，E-mail：mzyan@webmail.hzau.edu.cn
              通信作者：张永安，从事鱼类免疫与病害防控研究，E-mail：yonganzhang@hzau.edu.cn；
                      周洋，从事水生动物病原菌致病机理和生物防控研究，E-mail：zhouyang@mail.hzau.edu.cn
              ©《水产学报》编辑部（CC BY-NC-ND 4.0）                Copyright © Editorial Office of Journal of Fisheries of China (CC BY-NC-ND 4.0)
              中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries                        https://www.china-fishery.cn
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