Page 196 - 《水产学报》2026年第01期
P. 196

1 期                                     水    产    学    报                                 50 卷

              程。·OH    能够与细胞质膜中的多不饱和脂肪酸反                       循环量减少。由于肝脏是主要的铁储存场所,未
              应,生成脂质过氧化物,最终导致细胞铁死亡和                            与转铁蛋白结合的铁以           NTBI 的形式被肝脏迅速
              组织损伤    [4-6] 。                                  吸收,形成铁沉积,而铁的积累则可能引起肝脏
                   铁参与    DNA  修复、细胞线粒体呼吸、细胞                   的氧化损伤     [21-22] 。
              生长和红细胞生成等生物过程,还助力免疫防御                                草鱼   (Ctenopharyngodon idella) 是我国重要的
              和细胞信号传递        [7-8] 。为了满足体内对铁的需求,               淡水养殖品种,其产量长期位居我国淡水鱼产量
              机体一般通过两种途径获取铁:一种是从食物中                            之首。某些养殖户为盲目追求产量,会在实际养
              摄入,另一种是通过脾脏、肝脏和骨髓中的巨噬                            殖过程中添加过量饲料,饲料中过量的铁会引起
              细胞回收红细胞中          90%~95%  的铁  [8-9] 。摄入或储       血液和组织的氧化应激           [23-25] 。但是目前关于食源
              存的铁需要通过机体的铁代谢进行调控,以实现                            性铁过载对草鱼生长及组织的损伤作用相关研究
              正常利用和代谢。铁代谢主要包括                 5  个阶段:肠         尚不清楚。因此,本研究以草鱼为对象,通过在
              道吸收、体内转运、利用              (参与各种生化过程)、
                                                               饲料中添加不同含量的富马酸亚铁,从体内体外
              储存   (主要储存在肝脏和巨噬细胞) 以及肾脏排
                                                               探究食源性铁过载对草鱼的影响作用。本研究结
              泄 [1, 10-11] 。机体摄入的食源性铁主要以血红素铁和
                                                               果将丰富水产养殖动物中铁代谢生物学基础,也
              非血红素铁两种形式存在。其中,非血红素铁
                                                               为草鱼的健康养殖提供一定的依据。
                 3+
              (Fe ) 在被吸收之前需要通过肠道十二指肠的细胞
              色素   B(DCYTB) 还原为     Fe ,然后在二价金属转                1    材料与方法
                                      2+
              运蛋白    (DMT1) 的帮助下转运至循环系统             [12] 。到
              达循环系统的       Fe 会被亚铁氧化酶         (HP) 和铜蓝蛋         1.1    实验材料
                             2+
                         3+
              白氧化为     Fe ,与转铁蛋白        (Tf) 结合形成转铁蛋
                                                                   基础饲料购自中国通威股份有限公司;富马
              白结合铁。转铁蛋白结合铁再与转铁蛋白受体
              (TfR1) 结合,从胞外进入细胞。进入细胞的铁由                        酸亚铁购自中国科伦多食品配料有限公司;柠檬
              金属还原酶      (STEAP3) 还原为    Fe ,部分铁进入线            酸 铁 铵  (III)(FAC)、 DCFH-DA  购 自 美 国   Sigma-
                                           2+
              粒体参与各种生化反应,另一部分以铁蛋白的形                            Aldrich  公司;M199  培养基购自美国        Gibco  公司;
              式稳定储存,还有一部分通过膜铁转运蛋白                   (FPN1)     胎牛血清    (FBS) 购自美国    Cytiva 公司;FeRhoNox-
              排出细胞     [13-15] 。当摄入过量的铁时,体内的铁含                 1  购自日本   GORYO Chemical 公司;4%     多甲醛购
              量可能超出转铁蛋白的结合能力,出现非转铁蛋                            自美国   Biosharp Life Sciences 公司。
              白结合铁     (NTBI)。NTBI 中含有氧化还原活性成                   1.2    实验对象
              分,即不稳定性血浆铁            (LPI),LPI 容易被组织吸
                                                                   草鱼幼鱼     [(50.0±5.0) g,(17.0±0.5) cm)] 购自
              收,导致铁的沉积并产生毒性效果。过量进入细
              胞的铁可能形成不稳定铁池              (LIP),从而引发芬顿           广东某养鱼场。实验前,将鱼在装有过滤和充气
              反应,产生大量活性氧            (ROS),严重时可能导致              淡水的水槽中,在        (29±1.0) ℃  的温度下驯化     2  周。
              细胞铁死亡      [16-17] 。                             将鱼随机分为       3 组,每组    9 尾。使用富马酸亚铁
                   铁调素    (Hepcidin) 是铁代谢调节的核心,它               作为日粮中的额外铁源,制备额外添加不同浓度
              是一种富含半胱氨酸的抗菌肽,主要在肝脏中合                            富马酸亚铁     (0、400、800 mg/kg) 的日粮,分别对
              成和分泌     [11] 。Hepcidin  通过两种机制与唯一的铁             应低、中、高铁浓度组。持续投喂草鱼,在投喂
              输出蛋白     (FPN1) 相互作用:一是阻断          FPN1  的外      至  60 d  时采集血液和肝脏样品。实验过程中操作
              部开放,二是诱导           FPN1  的内吞和降解,最终               人员严格遵守实验动物伦理规范,并按照仲恺农
              导致细胞内铁的滞留,从而减少体内铁的循环                             业工程学院动物科技学院伦理委员会制定的规章
              量 [18-20] 。Hepcidin  异常升高会导致全身性缺铁和阻              制度执行。
              碍红细胞生成,而全身性缺铁在缺铁或铁过载期
                                                                1.3    生长性能
              间无法得到有效调节。循环铁浓度的稳定需要通
              过食源性铁的吸收、储存和再循环来维持 。当                                记录草鱼的体重和体长,通过计算增重率
                                                    [17]
              机体处于铁过载状态时,肝脏合成                 Hepcidin  的量     (WGR)、特定生长率        (SGR)、长度生长率        (LGR)
              增加,从而抑制膜铁转运蛋白的功能,使体内铁                            分析其生长性能,计算公式:

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
                                                            2
   191   192   193   194   195   196   197   198   199   200   201