Page 146 - 《水产学报》2026年第01期
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1 期                                     水    产    学    报                                 50 卷

              沙以供梭子蟹栖息         [2-4] 。底质不仅是梭子蟹栖息的              态变化，以探究梭子蟹养殖底质的恶化特征及其
              场所，还是其觅食和进食的场所，因此底质在养                            微生态原因，为三疣梭子蟹绿色健康养殖提供基
              殖系统的营养物质循环中扮演着“汇”和“源”的重                          础数据和理论参考。
              要角色 。在底质中，除了养殖动物梭子蟹外，
                     [5]
                                                                1    材料与方法
              还栖息着细菌、古菌和真菌等微生物，它们通过
              参与碳    (C)、氮  (N)、磷   (P)、硫  (S) 的生物地球化
                                                                1.1    实验材料、化学品和仪器
              学循环，影响着养殖系统的营养供应和生态平衡                    [6-7] 。
              然而，随着养殖周期的延长，水产动物的排泄物、                               三 疣 梭 子 蟹 成 蟹 共    50  只  (108.98±22.56) g，
              食物残渣和残体逐渐在底质中累积，造成底质的                            于  2023  年  10  月采购自宁波市咸祥一水产养殖场，
              有机负荷增加，引起底质微生物的过度繁殖，导                            以避光和充氧的方式在           1 h  内运至宁波大学中试
              致微生物群落失衡和生态功能改变，引发底质恶                            基地。把梭子蟹平均分布到             5  个帆布池   (长  1.5 m×
              化 [8-10] 。底质恶化主要表现为泡沫聚集增加、恶臭、                    宽  1.0 m×高  0.6 m) 中暂养。每个帆布池装有         300 L
              底质颜色变黑、溶解氧含量降低，硫化物、重金                            天然海水    (盐度  23~24，水温    27~28℃，pH 8.3~8.4，
                                                                  +
              属和硫化氢      (H S) 有毒有害物质积累等        [11-13] 。      NH -N < 0.5 mg/L)。实验所用底质取自宁波梅山
                                                                  4
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                   底质恶化不利于水产动物的健康，甚至威胁                         湾沿海滩涂沙子，经风干、过筛去掉大颗粒杂物
              着水产动物的生存。例如，底质中的硫化物会对                            后铺在池底，厚度约         5 cm。对海水进行       24 h  曝气，
              中华绒螯蟹      (Eriocheir sinensis) 的呼吸和能量代谢         使溶解氧含量维持在          6.5~6.6 mg/L。在为期   1  周的
              产生负面影响，可导致鳃组织细胞色素氧化酶活                            暂养期间，每日        16:00—18:00  按蟹体重的      5%  投
              性下降，而血糖和乳酸浓度上升 。由于底质与                            喂新鲜菲律宾蛤仔          (Ruditapes philippinarum)，喂
                                            [14]
              水体间存在密切的物质交换，底质恶化往往伴随                            食后  1 h  清除死蟹并清理残饵。
                                                      +
              着水体的富营养化、pH          下降以及氨态氮        (NH -N)、         100 μm  孔径的无菌尼龙网购自北京兰杰柯科
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                                            −
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              亚硝态氮     (NO -N) 和硝态氮     (NO -N) 等指标的升          技有限公司，0.45       和  0.22 μm  孔径的聚碳酸酯膜
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              高  [8-9] 。 例 如 ， NH -N +  过 高 会 导 致 凡 纳 滨 对 虾    购 自 美 国   Millipore 公 司 ， 哈 希 试 剂 购 自 美 国
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              (Litopenaeus vannamei) 的鳃丝肿胀，毛细血管网               Danaher 公司，土壤基因组        DNA  提取试剂盒购自
                                       [15]
              结构形态改变，鳃组织破裂 。                                   美国  MP Biomedicals 公司，DNA    纯化试剂盒、实
                   作为  CNPS  元素循环的重要驱动者 ，微生                    时荧光定量      PCR  试剂  (SYBR Premix Ex TaqⅡ) 和
                                                  [16]
              物与养殖水体的水质变化密切相关。在三疣梭子                            pMD19-T  载体均购自日本       TaKaRa 公司，ROX      参
              蟹养殖水体中，酸化导致的水体细菌群落结构和                            比染料    II (50×ROX Reference DyeⅡ) 购自上海翌
              功能改变对水体的          NH -N、NO -N −  和  NO -N −  水   圣生物科技股份有限公司，灭菌双蒸水                    (ddH O)
                                   +
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              平具有重要贡献         [17] 。而在拟穴青蟹      (Scylla para-  购自上海圻明生物科技有限公司。
              mamosain) 育苗水体中，循环水养殖系统水体富集                          TD20002 电子天平     (余姚市金诺天平仪器有
              的橙黄褐指藻杆菌           (Phaeodactylibacter)、黏着杆      限公司)；彼得森抓斗式采泥器              (济宁市裕泽工业
              菌  (Tenacibaculum) 和氢嗜菌    (Hydrogenophaga) 可    科技有限公司)；厘米刻度尺             (宁波得力集团有限
              能通过同步硝化和反硝化作用去除水体中的含氮                            公司)；超声波清洗机          (广州科盟清洁技术有限公
              污染物 。然而，目前仅有少量研究涉及甲壳类                            司)；纯水仪     (杭州景元科技有限公司)；Spectrum
                     [18]
              动物养殖底质恶化的表观现象               [12, 19] ，鲜有底质恶      IQ150  土壤原位   pH  计  (Spectrum Technologies，美
              化相关的微生物群落结构和功能的研究报道。                             国 )； YSI  便 携 式 多 参 数 水 质 分 析 仪      (Yellow
                   为此，本研究采用海沙为底质，模拟开展了                         Springs， 美 国 )； NanoDrop2000   分 光 光 度 计
              为期   28 d 的三疣梭子蟹成蟹的室内帆布池养殖，                      (Thermo Fisher，美国)；哈希      DR900  多参数便携
              分析了养殖底质在表观及理化指标的时序变化                             式比色计     (HACH，美国)；梯度         PCR  仪  (Thermo
              特 征 ； 同 时 采 用    16S  rRNA  基 因 扩 增 子 测 序 、      Fisher，美国)；琼脂糖凝胶电泳仪            (北京六一仪器
              FAPROTAX   功 能 预 测 和 定 量 聚 合 酶 链 式 反 应           厂)；MiSeq  高通量测序仪       (Illumina，美国)，低温
              (qPCR) 技术分析了底质细菌群落结构和功能的动                        高速离心机      (Eppendorf，德国)，Roche480   荧光定

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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