Page 22 - 《水产学报》2025年第8期
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黄泽翔，等                                                                 水产学报, 2025, 49(8): 089102

              针对应的      Opal 570、Opal 520  和  Opal 690  荧光     2    结果
              染料 (Akoya Biosciences, 美国) 滴在载玻片组织
              上，40 ℃ 孵育     30 min，滴加    HRP  阻断剂，40 ℃             实验采用      RNAscope 原位杂交技术，检测
              孵育   15 min。复染和封片，滴加            DAPI 染料复         gr1  和  gr2  基因在克氏双锯鱼脑部的表达分布模
              染  30 s，最后加入       Prolong Gold  防淬灭封片剂          式。结果显示，gr1         和  gr2  基因  mRNA  阳性信
              (Thermo Fisher Scientific，美国) 进行封片。              号广泛分布于端脑、间脑、中脑和小脑 (图                     1)。

                                                               在端脑中，gr1       和  gr2  基因主要在端脑背部内
              1.3    图像处理
                                                               侧  3  区 (Dm3)、端脑背部内侧         2  区 (Dm2)、端
                   运用   Nikon A1R HD25  超高分辨率激光共               脑背部外侧后部 (DIp)、端脑背部后侧 (Dp) 和
              聚焦显微镜进行观察并拍照记录，利用                       NIS-     端脑腹侧后连合部 (Vp) 高表达           (图版Ⅰ)。同时，
              Elements Viewer 5.21  软件进行图像处理和        Adobe     位于端脑和下丘脑之间的视前区，即视前核小
              illustrator 2020  软件整理排版。                        细胞部 (NPOpc)、视前核前腹侧部 (NPOav)、视


                                         Dm3              Dm2               DIp                Dp


                        gr1


                            20 μm         1   20 μm         2  20 μm         3   20 μm         4
                                         Dm3              Dm2               DIp                Dp



                        gr2


                            20 μm         5   20 μm         6  20 μm         7   20 μm         8
                                          Vp             NPOpc            NPOav            Control−



                        gr1


                            20 μm         9   20 μm        10  20 μm         11  20 μm         12
                                          Vp             NPOpc            NPOav            Control+



                        gr2


                            20 μm         13  20 μm        14  20 μm         15  20 μm         16

                                   图版 Ⅰ    gr1、gr2  信号分子在克氏双锯鱼脑冠状切面            b  的分布
              1~4，9~11  及  5~8，13~15. 分别表示  gr1  和  gr2  基因在  Dm3、Dm2、DIp、Dp、Vp、NPOpc 和  NPOav  区域表达情况。12. 阴性对照，
              16. 阳性对照。Dm3. 端脑背部内侧    3  区，Dm2. 端脑背部内侧  2  区，DIp. 端脑背部外侧后部，Dp. 端脑背部后侧，Vp. 端脑腹侧后连合部，
              NPOpc. 视前核小细胞部，NPOav. 视前核前腹侧部。gr1     信号分子为绿色，gr2    信号分子为橙色，细胞核用      DPAI 染成为蓝色。
                        Plate Ⅰ Distribution of gr1 and gr2 signalling molecules in the coronal section b of A. clarkii
              1-4, 9-11 and 5-8, 13-15. indicate gr1 and gr2 genes expression in the Dm3, Dm2, DIp, Dp, Vp, NPOpc, and NPOav regions, respectively. 12. negative
              control, 16. positive control, Dm3. subdivision 3 of the medial dorsal telencephalic area, Dm2. subdivision 2 of the medial dorsal telencephalic area, DIp.
              lateral posterior part of the dorsal telencephalic area, Dp. posterior portion of the dorsal telencephalon, Vp. postcommissural part of the ventral telenceph-
              alon, NPOpc. parvocellular part of the parvocellular preoptic nucleus, NPOav. anteroventral part of the parvocellular preoptic nucleus. gr1 signalling
              molecules are green, gr2 signalling molecules are orange, and the nuclei are stained blue with DPAI.

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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