Page 84 - 《水产学报》2025年第6期
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李春，等                                                                  水产学报, 2025, 49(6): 069107

              变化 。当高温胁迫达到一定耐受性范围或区                             (MDA) 含量均采用北京索莱宝科技有限公司所
                   [10]
              间时，会引起缢蛏体内抗氧化免疫反应，其抗                             生产的试剂盒测定。
              氧化防御系统会做出响应以降低高温对机体造                                 采用电子天平        (精确度    0.001 g) 称量体重。
              成的损伤  。目前高温胁迫对缢蛏在生理、氧                            存活率为各时间点缢蛏存活个数与前一时间
                        [11]
              化应激影响的研究较少，因此，本实验以缢蛏                             点采样后的存活个数的比值。存活率 (survival
              为研究对象，分析了缢蛏高温胁迫条件下的存                             rate, R )、耗氧率 (oxygen consumption rate, R )、
                                                                                                        O
                                                                    S
              活能力、生理代谢和抗氧化水平，旨在进一步                             排 氨 率  (ammonia excretion rate, R ) 和 氧 氮 比
                                                                                              N
              解析缢蛏高温耐受性的生理机制以及为培育缢                             (oxygen nitrogen ratio, R O∶N ) 的计算公式：
              蛏耐高温新品系提供参考资料。                                       R  (%) = N /N ×100%
                                                                     S       S  T
                                                                   R  [μg/(g·h)] = [ (DO −DO ) ×V ] / (W×t)
                                                                                           t
                                                                                      0
                                                                     O
              1    材料与方法
                                                                   R  [μg/(g·h)] = [ (N −N ) ×V ] / (W×t)
                                                                     N              t  0

                                                                   R     = (R /16) / ( R /14)
              1.1    实验材料                                            O∶N    O        N
                                                               式中，N 代表各时间点存活个数；N 代表前一
                                                                                                 T
                                                                      S
                   实验所用缢蛏取自浙江台州市三门县苗种                          时间点采样后的存活个数；DO 代表实验开始
                                                                                            0
              繁育基地，缢蛏平均壳长 (3.37±0.24) cm。缢蛏                    时空白组水中含氧量 (mg/L)；DO 代表实验结
                                                                                              t
              在室内长方体塑料盆中            (48 cm×37 cm×20 cm) 暂
                                                               束时实验组水中含氧量 (mg/L)；N 和          0   N 分别代
                                                                                                   t
              养  7 d，暂养时用加热棒控制温度为                24 °C，期       表实验开始时对照组水中含氮量 (mg/L) 和实验
              间定时投喂牟氏角毛藻 (Chaetoceros muelleri)，
                                                               结束时实验组水中含氮量 (mg/L)；V               为呼吸瓶
                                         5
                                                5
              藻水盐度为       18，密度为     3×10 ~8 ×10  个/mL。

                                                               中水的体积 (L)；W       为缢蛏软体部干重 (g)；t 为
              1.2    实验设计                                      实验持续时间 (h)。

                   实验设置      1  个对照组    (温度   24 °C) 和  2  个   1.5    统计分析
              高温组    (温度   28 °C、32 °C)，各设     3  个平行组，
              每个平行组分别放置           60  只缢蛏，静水充气，实                   实验数据用平均值±标准差 (mean±SD) 表
              验持续    72 h。实验期间每天         8：00  和  20：00  各     示，利用     SPSS22.0  统计软件进行独立样本           T  检
                                                               验，比较检测数据差异的显著性，以                   P<0.05  为
              换水   1  次，换水量为      100%。分别在实验开始后
              第  6、12、24、48    和  72  小时，采用室内静水法               差异显著。

              测定缢蛏的耗氧率和排氨率。通过实时控温的
              加热棒进行温度调节。盐度使用精密数字盐度                             2    结果

              仪 (MASTER-α, ATAGO) 测定。盐水用专用的                    2.1    高温对缢蛏存活率的影响
              生化海水结晶(浙江省盐业集团台州市盐业配送
                                                                   利用单因素方差分析高温对缢蛏存活率的
              有限公司)配制。
                                                               影响，结果显示，实验期间高温组比相同时间

              1.3    样品采集                                      点对照组的死亡率高，24 °C             组  (对照组) 缢蛏
                   实验开始后分别在第            0、6、12、24、48、          存活率始终大于高温组，32 °C              组存活率最小
              72  小时取样，每个平行组在各时间点随机取                     6     (表  1)。24 h  后存活率出现明显分化，24 °C             组
              只缢蛏，取其鳃和肝胰腺组织。采集的样本首                             存活率为     95.6%，显著高于       28 °C  组 (86.7%) 和
              先放入液氮中，再转至−80 °C             冻存待用。本研             32 °C  组 (76.7%) (P<0.05)，且  28 °C  组显著高
              究获得了上海海洋大学水产与生命学院实验动                             于  32 °C  组 (P<0.05)。72 h  胁迫期内，32 °C     组
              物管理和使用伦理委员会批准，实验过程中操                             缢蛏出现较高的致死率 (80.0%)。胁迫后期，不
              作人员严格遵守上海海洋大学水产与生命学院                             同温度组间的存活差异逐渐增大，温度越高，
              伦理规范，并按照上海海洋大学水产与生命学                             存活率的下降越显著 (P<0.05)。

              院伦理委员会制定的规章制度执行。
                                                               2.2    高温对缢蛏耗氧率和排氨率的影响

              1.4    测定指标及计算公式
                                                                   在高温胁迫后，两个高温组之间以及与对
                   超 氧 化 物 歧 化 酶  (SOD)  活 性 和 丙 二 醛           照 组  (24  °C  组 ) 之 间 耗 氧 率 具 有 显 著 差 异

              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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