Page 34 - 《水产学报》2025年第6期
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雷丽娜,等 水产学报, 2025, 49(6): 069403
2.5 原核表达并纯化的重组蛋白及中国花鲈 纯化,收集紫外吸收峰值下边的蛋白液,SDS-
IgMH 多克隆抗体 PAGE 凝胶电泳均显示单一的蛋白条带 (图 10-
a)。将获得的单管纯度较高的 IgMH-pET21d 蛋
通过对重组质粒 IgMH-pET21d 和 IgMCH - 白浓缩后用于多克隆抗体的制备。对 MHCⅡ β-
1-2
pET21d 分别进行大量诱导,待包涵体提取之后,
pET21d 重组质粒采用同样的诱导和纯化方式获
进行 SDS-PAGE 凝胶电泳,分别有相对分子质 得了与预测蛋白分子量相近的 MHCⅡ β 的重组
量约为 63.8 ku 和 24.1 ku 的包涵体形式的蛋白 蛋白 (图 10-b)。
表达,包涵体经过复性后通过凝胶层析色谱柱 所制备的中国花鲈 IgMH 抗体能与原核表
leader FR1 CDR1 FR2 CDR2 FR3
中国花鲈 L. maculatus 104
斜带石斑鱼 E. coioides 104
鳜 S. chuatsi 81
大口黑鲈 M. salmoides 100
大黄鱼 L. crocea 104
红笛鲷 L. sanguineus 106
尼罗罗非鱼 O. niloticus 104
欧洲舌齿鲈 D. labrax 104
军曹鱼 R. canadum 101
CDR3 FR4
中国花鲈 L. maculatus 142
斜带石斑鱼 E. coioides 147
鳜 S. chuatsi 120
大口黑鲈 M. salmoides 137
大黄鱼 L. crocea 140
红笛鲷 L. sanguineus 143
尼罗罗非鱼 O. niloticus 145
欧洲舌齿鲈 D. labrax 145
军曹鱼 R. canadum 138
(a)
CH1 CH2
中国花鲈 L. maculatus 113
斜带石斑鱼 E. coioides 110
鳜 S. chuatsi 110
大口黑鲈 M. salmoides 108
大黄鱼 L. crocea 111
红笛鲷 L. sanguineus 110
尼罗罗非鱼 O. niloticus 114
欧洲舌齿鲈 D. labrax 110
军曹鱼 R. canadum 109
黄尾 S. lalandi 114
CH3
中国花鲈 L. maculatus 229
斜带石斑鱼 E. coioides 225
鳜 S. chuatsi 224
大口黑鲈 M. salmoides 223
大黄鱼 L. crocea 225
红笛鲷 L. sanguineus 227
尼罗罗非鱼 O. niloticus 221
欧洲舌齿鲈 D. labrax 228
军曹鱼 R. canadum 226
黄尾 S. lalandi 228
CH4
中国花鲈 L. maculatus 343
斜带石斑鱼 E. coioides 340
鳜 S. chuatsi 336
大口黑鲈 M. salmoides 337
大黄鱼 L. crocea 338
红笛鲷 L. sanguineus 346
尼罗罗非鱼 O. niloticus 334
欧洲舌齿鲈 D. labrax 342
军曹鱼 R. canadum 337
黄尾 S. lalandi 338
中国花鲈 L. maculatus 425
斜带石斑鱼 E. coioides 421
鳜 S. chuatsi 417
大口黑鲈 M. salmoides 418
大黄鱼 L. crocea 419
红笛鲷 L. sanguineus 428
尼罗罗非鱼 O. niloticus 415
欧洲舌齿鲈 D. labrax 422
军曹鱼 R. canadum 418
黄尾 S. lalandi 420
(b)
(图 2 Fig . 2)
https://www.china-fishery.cn 中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries
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