Page 34 - 《水产学报》2025年第6期
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雷丽娜,等                                                                 水产学报, 2025, 49(6): 069403

              2.5    原核表达并纯化的重组蛋白及中国花鲈                         纯化,收集紫外吸收峰值下边的蛋白液,SDS-
              IgMH  多克隆抗体                                      PAGE  凝胶电泳均显示单一的蛋白条带                 (图  10-
                                                               a)。将获得的单管纯度较高的              IgMH-pET21d   蛋
                   通过对重组质粒        IgMH-pET21d  和  IgMCH -      白浓缩后用于多克隆抗体的制备。对                   MHCⅡ β-
                                                        1-2
              pET21d  分别进行大量诱导,待包涵体提取之后,
                                                               pET21d  重组质粒采用同样的诱导和纯化方式获
              进行   SDS-PAGE   凝胶电泳,分别有相对分子质                    得了与预测蛋白分子量相近的               MHCⅡ β   的重组
              量约为     63.8 ku  和  24.1 ku  的包涵体形式的蛋白           蛋白  (图  10-b)。
              表达,包涵体经过复性后通过凝胶层析色谱柱                                 所制备的中国花鲈          IgMH  抗体能与原核表


                                       leader        FR1    CDR1    FR2      CDR2         FR3
                   中国花鲈 L. maculatus                                                                104
                   斜带石斑鱼 E. coioides                                                                104
                          鳜 S. chuatsi                                                              81
                   大口黑鲈 M. salmoides                                                                100
                       大黄鱼 L. crocea                                                                104
                    红笛鲷 L. sanguineus                                                               106
                   尼罗罗非鱼 O. niloticus                                                               104
                    欧洲舌齿鲈 D. labrax                                                                 104
                     军曹鱼 R. canadum                                                                 101
                                            CDR3     FR4
                   中国花鲈 L. maculatus                            142
                   斜带石斑鱼 E. coioides                            147
                          鳜 S. chuatsi                          120
                   大口黑鲈 M. salmoides                            137
                       大黄鱼 L. crocea                            140
                    红笛鲷 L. sanguineus                           143
                   尼罗罗非鱼 O. niloticus                           145
                    欧洲舌齿鲈 D. labrax                             145
                     军曹鱼 R. canadum                             138
                                                                  (a)
                                    CH1                                                      CH2
                   中国花鲈 L. maculatus                                                                113
                   斜带石斑鱼 E. coioides                                                                110
                          鳜 S. chuatsi                                                              110
                   大口黑鲈 M. salmoides                                                                108
                       大黄鱼 L. crocea                                                                111
                    红笛鲷 L. sanguineus                                                               110
                   尼罗罗非鱼 O. niloticus                                                               114
                    欧洲舌齿鲈 D. labrax                                                                 110
                     军曹鱼 R. canadum                                                                 109
                       黄尾    S. lalandi                                                             114
                                                                                      CH3
                   中国花鲈 L. maculatus                                                                229
                   斜带石斑鱼 E. coioides                                                                225
                          鳜 S. chuatsi                                                              224
                   大口黑鲈 M. salmoides                                                                223
                       大黄鱼 L. crocea                                                                225
                    红笛鲷 L. sanguineus                                                               227
                   尼罗罗非鱼 O. niloticus                                                               221
                    欧洲舌齿鲈 D. labrax                                                                 228
                     军曹鱼 R. canadum                                                                 226
                       黄尾    S. lalandi                                                             228
                                                                                      CH4
                   中国花鲈 L. maculatus                                                                343
                   斜带石斑鱼 E. coioides                                                                340
                          鳜 S. chuatsi                                                              336
                   大口黑鲈 M. salmoides                                                                337
                       大黄鱼 L. crocea                                                                338
                    红笛鲷 L. sanguineus                                                               346
                   尼罗罗非鱼 O. niloticus                                                               334
                    欧洲舌齿鲈 D. labrax                                                                 342
                     军曹鱼 R. canadum                                                                 337
                       黄尾    S. lalandi                                                             338
                   中国花鲈 L. maculatus                                             425
                   斜带石斑鱼 E. coioides                                             421
                          鳜 S. chuatsi                                           417
                   大口黑鲈 M. salmoides                                             418
                       大黄鱼 L. crocea                                             419
                    红笛鲷 L. sanguineus                                            428
                   尼罗罗非鱼 O. niloticus                                            415
                    欧洲舌齿鲈 D. labrax                                              422
                     军曹鱼 R. canadum                                              418
                       黄尾    S. lalandi                                          420
                                                                  (b)
                                                                                         (图 2  Fig . 2)
              https://www.china-fishery.cn                           中国水产学会主办    sponsored by China Society of Fisheries
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