Page 38 - 《水产学报》2025年第6期
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雷丽娜,等 水产学报, 2025, 49(6): 069403
15.0 4 3 6 h
10.0
相对表达量 relative expression level to ef1a 5.0 差异倍数 fold change 2 1 * ** * * 12 h
24 h
48 h
0.4
72 h
0.3
0.2
0.1
2
0
1 2 3 4 5 6 7 8 0 1 组织 * 3
ቆᆮ tissues
tissues (a)
(a)
2.5
** 6 h
0.80
2.0
0.60
相对表达量 relative expression level to ef1a 0.40 差异倍数 fold change 1.5 * * * ** 12 h
24 h
1.0
0.20
48 h
0.20
72 h
0.5
0.15
0.10
0.05
2
组织
0
3 1 2 5 6 4 7 8 0 1 tissues 3
ቆᆮ
(b)
tissues
(b) 图 7 LPS 刺激后中国花鲈组织中 IgMH (a) 和
图 6 IgMH (a) 和 MHCⅡ β (b) 组织表达分析 MHCⅡ β (b) mRNA 表达分析
IgMH 和 MHCⅡ β 的相对表达量以内参基因 EF-1α 表达水平为标 IgMH 和 MHCⅡ β mRNA 表达水平是相对于 EF-1α 水平表示,在
准。数据显示为平均值±标准误 (n=4),下同。1. 脾脏,2. 头肾, PBS (对照) 和 LPS 刺激 6~72 h 的表达结果。1. 鳃,2. 头肾,3. 脾
3. 鳃,4. 肌肉,5. 脑,6. 肠道,7. 皮肤,8. 肝脏。 脏。“*”表示差异显著 (P<0.05),“**”表示差异极显著 (P<0.01);
下同。
Fig. 6 Tissue expression analysis of IgMH (a) and
Fig. 7 Analysis of IgMH (a) and MHCⅡβ (b) mRNA
MHCⅡ β (b)
expression after LPS stimulation in L. maculatus
The relative expression levels of IgMH and MHCⅡ β were expressed as
IgMH and MHCⅡβ mRNA levels expressed as a ratio relative to EF-1α
arbitrary units that were normalised against the expression levels of EF-
levels after stimulating with PBS (control) and LPS for 6 h to 72 h.
1α. Data are shown as mean±SE (n=4), the same below. 1. spleen, 2.
1. spleen, 2. head kidney, 3. gill. "*" indicate significant difference
head kidney, 3. gill, 4. muscle, 5. brain, 6. intestine, 7. skin, 8. liver.
(P<0.05); "**" indicate extremely significant difference (P<0.01), the
本研究所克隆的中国花鲈 IgMH 在 FR3 骨架区 same below.
所含的 DX3YYC 以及 FR3 中存在的 V 家族的
了刘悦等 [11] 报道的“L. japonicus”并非隶属鮨科
保守区域 FDYWGKGT-VTV-S 是免疫球蛋白的 的中国花鲈,而应该隶属太阳鱼科,推测其为
结构折叠所必需的 ,虽 FR2 骨架区包含的疏 大口黑鲈的一地方群体。此外,通过比对发现,
[8]
水氨基酸残基 GKGLEW 在中国花鲈的 IgMH 中 本研究克隆得到的 MHCⅡ β 氨基酸数目在鲈形
也有发现,但 GLE 被 PMD 所代替 (图 2-a)。通 目鱼类中比较保守,均为 249 个氨基酸;在结
过对 IgMH 恒定区氨基酸的一致性和相似性比 构上同其他鱼类一致,均具有 MHCⅡ β 结构
较 (表 2),验证了中国花鲈与鳜的亲缘关系,同 域 (β1 domain 和 β2 domain) 以及 IGc1 结构域;
时也表明了 IgMH恒定区在鲈形目鱼中一致性 在通过对中国花鲈 MHCⅡ β 与其他鱼类进行多
约为 60%。比较结果显示,“L. japonicus” [11] 与 序列比对分析发现,在中国花鲈中存在保守的
鮨科鱼类鳜 和斜带石斑鱼 [10] 的序列一致性分 N-乙酰化位点和蛋白激酶 C 磷酸化位点,这些
[9]
别为 73.6% 和 59.9%,而与隶属太阳鱼科的大 结构特点同样在尼罗罗非鱼 [34] 和大黄鱼等鱼类
口黑鲈 [13] 的序列一致性高达 94.5%,由此说明 中有所发现 (图 2-b)。所克隆的 IgMH 和 MHCⅡ β
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