Page 41 - 《水产学报》2025年第6期

雷丽娜，等 水产学报, 2025, 49(6): 069403

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mRNA 的表达早期出现上调结果一致 。而在 制备，为探究中国花鲈 B 细胞特性和免疫学功
脾脏中则是在受到刺激后先出现显著下调再出 能以及病原诊断等奠定了基础。
现显著上调，与大黄鱼脾脏中早期出现上调的
结 果 不 同 ， 但 在 虹 鳟 急 性 病 毒 感 染 期 间 ， 参考文献 (References)：
MHCII β 基因表达水平显著下调 [42] ，说明不同 [ 1 ] 张小萍, 梁筱燕, 张庆璜, 等. 尼罗罗非鱼血清免疫球蛋白单
鱼类组织对于对免疫反应的调节作用可能存在 克隆抗体制备及鉴定 [J]. 免疫学杂志, 2013, 29(8): 663-667.
差异。最近的研究表明，鱼类中的 Poly (I:C) 可 Zhang X P, Liang X Y, Zhang Q H, et al. Preparation and char-
以诱导 IFN-γ 基因表达 [43] 。此外，通过相关实 acterization of monoclonal antibodies against serum immuno-
globulin from Oreochromis niloticus[J]. Immunological
验已确定 MHC-Ⅱ反式激活蛋白 (CIITA) 的表达
Journal, 2013, 29(8): 663-667 (in Chinese).
受 IFN-γ 调节 [44] 。因此实验推测，鳃和头肾中
[ 2 ] Danilova N, Bussmann J, Jekosch K, et al. The immuno-
MHCⅡ β 基因表达的明显上调可能是 Poly (I:C)
globulin heavy-chain locus in zebrafish: identification and
诱导产生 IFN-γ 的结果。
expression of a previously unknown isotype, immunoglobulin
通过原核表达载体构建及分子筛层析等技
Z[J]. Nature Immunology, 2005, 6(3): 295-302.
术 纯 化 获 得 中 国 花 鲈 IgMH、 IgMCH 1- 2 和 [ 3 ] Savan R, Aman A, Nakao M, et al. Discovery of a novel
MHCⅡ β 的重组蛋白，其中 IgM-pET21d 重组 immunoglobulin heavy chain gene chimera from common carp
蛋白的分子量大小与刘悦等 [11] 获得的日本花鲈 (Cyprinus carpio L. )[J]. Immunogenetics, 2005, 57(6): 458-
IgMH 重组蛋白的结果相近。免疫印迹结果显 463.
示，制备获得的 anti-IgMH 多克隆抗体能够与 [ 4 ] Wilson M R, Warr G W. Fish immunoglobulins and the genes
中国花鲈 IgMH 重组蛋白以及全血清发生特异 that encode them[J]. Annual Review of Fish Diseases, 1992, 2:
性结合，并能与鳜全血清发生交叉反应，但与 201-221.
大口黑鲈和草鱼的全血清不发生结合，这从蛋 [ 5 ] Boes M. Role of natural and immune IgM antibodies in immune
白水平上证明了中国花鲈与鳜的亲缘关系较近。 responses[J]. Molecular Immunology, 2000, 37(18): 1141-1149.
[ 6 ] Arnold J N, Dwek R A, Rudd P M, et al. Mannan binding lectin
根据氨基酸序列推测获得的 IgMH 原核重组蛋
and its interaction with immunoglobulins in health and in dis-
白相对分子质量约为 63.8 ku，而免疫印迹结果
ease[J]. Immunology Letters, 2006, 106(2): 103-110.
显示，血清中 IgM 重链的分子质量大小明显高
[ 7 ] 叶剑敏, 王玉红, 丁明媚, 等. 硬骨鱼 IgM 结构和功能及其体
于重组蛋白，该分子量大小与张福淼等 [45] 分离
液免疫应答 [J]. 华南师范大学学报 (自然科学版), 2015,
纯化鲈血清得到的 IgM 重链分子质量大小为 72
47(5): 1-8.
ku 相近。分析其原因可能由于中国花鲈 B 淋巴 Ye J M, Wang Y H, Ding M M, et al. Teleost IgM structure,
细胞中的重链分子在天然状态下可发生强烈的 function and humoral immune response[J]. Journal of South
糖基化作用 (其结构上具有 4 个糖基化位点)， China Normal University (Natural Science Edition), 2015,
而通过原核表达系统纯化出来的蛋白不具备糖 47(5): 1-8 (in Chinese).
基化修饰所造成 。 [ 8 ] 张武凤, 张小萍, 王亚凤, 等. 尼罗罗非鱼 IgM 重链基因的克
[46]
本研究通过对中国花鲈 IgMH 和 MHCⅡ β 隆及其抗血清的制备 [J]. 免疫学杂志, 2015, 31(1): 67-70.
基因克隆与生物信息学分析，丰富了对于中国 Zhang W F, Zhang X P, Wang Y F, et al. cDNA cloning and
花鲈适应性免疫相关基因的研究，同时也从进 antiserum preparation of IgM in Nile tilapia (Oreochromis
Niloticus)[J]. Immunological Journal, 2015, 31(1): 67-70 (in
化的角度确定了中国花鲈与石斑鱼和鳜等鮨科
Chinese).
鱼类的亲缘关系。通过感染和刺激实验，发现
[ 9 ] Zhang Y A, Nie P, Wang Y P, et al. cDNA sequence encoding
中国花鲈头肾脏、脾脏和鳃组织中 IgMH 和
immunoglobulin M heavy chain of the mandarin fish Siniperca
MHCⅡβ 在 mRNA 水平上显著上调，说明在感
chuatsi[J]. Fish & Shellfish Immunology, 2003, 14(5): 477-480.
染病原微生物后，这些器官均产生了不同程度
[10] Cheng C A, John J A C, Wu M S, et al. Characterization of
的免疫反应，激发了适应性免疫系统调控，为 serum immunoglobulin M of grouper and cDNA cloning of its
后续应对中国花鲈的细菌或病毒感染实验制定 heavy chain[J]. Veterinary Immunology & Immunopathology,
策略提供了新思路。中国花鲈 anti-IgM 抗体的 2006, 109(3-4): 255-265.

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