Page 40 - 《水产学报》2025年第6期

雷丽娜，等 水产学报, 2025, 49(6): 069403

ku M 1 2 3 ku M 1 2 3 表达量虽然早期显著性上调，但在 48 h出现下
170
130 调之后恢复增加，这一结果与西伯利亚鲟细菌
130
95 95 感染后体内 的表达量变化趋势
72 72 MHCⅡ β mRNA
55 55 一致 。
[21]
43 43
与尼罗罗非鱼人工感染嗜水气单胞菌 (Aero-
34 34
monas hydrophila) 后的表达状况 [34] 类似，人工
26 26
感染迟缓爱德华氏菌后 6~24 h，中国花鲈头肾
17 17
和脾脏 IgMH 的 mRNA 表达显著上调，且上调
10 10 幅度高于 LPS 刺激，上调倍数约为后者 2 倍；
(a) (b)
中国花鲈 MHCⅡ β 在头肾和脾脏中 mRNA 表
图 10 IgMH (a) 和 MHCⅡ β (b) 重组蛋白 SDS-PAGE
达水平变化与 IgMH mRNA 相似，在前期出现
M. 蛋 白 marker； (a) 1~2. IgMH 蛋 白 ， 3. IgMHC 1- 蛋 白 ， (b) 1.
2
MHCⅡ β 菌液破碎后上清液，2. MHCⅡ β 菌液破碎后包涵体，3. 显著上调，在 48 h 趋于正常水平或下调，在鳃
MHCⅡ β 蛋白。 中感染早期出现显著上调后逐渐趋于正常水平，
Fig. 10 SDS-PAGE of recombinant protein expression 表明 MHCⅡ β 对于中国花鲈抵御迟缓爱德华氏
IgMH (a) and MHCⅡ β (b)
菌感染起重要的作用。在细菌感染后 MHCⅡ β
M. protein marker; (a) 1-2. IgMH protein, 3. IgMH C1-2 protein, (b) 1.
与 IgMH 的基因表达量同步显著上调可能与触
supernatant of broken MHCⅡ β bacterial solution, 2. inclusion bodies
发鱼体异己成分识别机制进而激发特异性免疫
after MHCⅡ β bacterial solution was broken, 3. purified MHCⅡ β protein.
反应相关 。
[40]
捕获，进而引起免疫反应 。中国花鲈在受到 Poly (I:C) (聚肌苷酸胞苷酸) 是一种人工合
[38]
LPS 刺激后，IgMH mRNA 的表达量在鳃和脾脏 成的病毒双链 RNA(dsRNA) 类似物，其调节机
中产生了较为显著的变化，在 24 和 72 h 均显 体 免 疫 功 能 与 单 核 吞 噬 细 胞 的 活 性 有 关 [41] 。
[39]
著上调，这同斑马鱼 IgM 在 LPS 刺激后 24 h Poly (I:C) 刺激后，中国花鲈 IgMH mRNA 的表
内表达水平变化的结果相一致，而头肾中 IgM 达量在鳃和脾脏中的变化比较大，在头肾中变

mRNA 在此时间段的表达量变化不大，在 48 h 化不明显，并且在鳃和脾脏中虽然总体上调，
呈现显著下调，其下调原因有待进一步研究。 但是随时间变化的趋势并不一致。MHCⅡ β 基
中国花鲈 MHCⅡ β mRNA 的表达量在鳃、头肾 因在鳃、脾脏和头肾中差异表达，鳃和头肾中
和脾脏中的表达水平存在差异，在鳃和脾脏中 在刺激早期出现显著上调，这与大黄鱼在 Poly
均出现了显著下调，头肾中 MHCⅡ β mRNA 的 (I:C) 刺激下，肠和肾脏中的 MHCⅡ-α 和 β 类

M 1 2 3 4 5 6 7 M 1 2
ku ku
170
170 130
130 95
95
55
55
43
43
34 34
26
26
17 17
10 10
(a) (b)
图 11 多克隆抗体的免疫印迹分析
(a) IgMH 多克隆抗体特异性检测。(b) 迟缓爱德华氏菌感染前后中国花鲈血清 IgMH 含量检测，M. 蛋白 marker ；1. 中国花鲈正常血清，2.
感染爱德华氏菌 12 h 后的中国花鲈血清，3. 鳜全血清，4. 大口黑鲈全血清，5. 草鱼全血清，6~7. 纯化后的 IgMH 蛋白 (25.5 μg/mL，53.125
μg/mL)。
Fig. 11 Western blot analysis of polyclonal antibody
(a) specificity detection of the polyclonal antibody against L. maculatus IgMH; (b) detection of IgMH content in serum of L. maculatus before and after
E. tarda infection. M. protein marker; 1. L. maculatus whole serum, 2. serum from L. maculatus 12 h after infection with E. tarda , 3. S. chuatsi whole
serum, 4. M. salmoides whole serum, 5. C. idella whole serum, 6-7. purified recombinant IgMH protein (25.5 μg/mL, 53.125 μg/mL).

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