Page 73 - 《水产学报》2025年第5期

王金霓，等 水产学报, 2025, 49(5): 059607

St14 St15 St16 St17 St18 St19 St20

ZW
50 μm 1 50 μm 2 50 μm 3 50 μm 4 50 μm 5 50 μm 6 50 μm 7

12.5 μm 1′ 12.5 μm 2′ 12.5 μm 3′ 12.5 μm 4′ 12.5 μm 5′ 12.5 μm 6′ 12.5 μm 7′

ZZ
50 μm 8 50 μm 9 50 μm 10 50 μm 11 50 μm 12 50 μm 13 50 μm 14

12.5 μm 8′ 12.5 μm 9′ 12.5 μm 10′ 12.5 μm 11′ 12.5 μm 12′ 12.5 μm 13′ 12.5 μm 14′
DDX4/CTNNB1/DAPI
图版 Ⅲ 中华鳖 14~20 期性腺中 DDX4 蛋白的免疫荧光
1~7. 中华鳖 14~20 期 ZW 雌性的性腺中 DDX4 蛋白变化分析，8~14. 中华鳖 14~20 期 ZZ 雄性的性腺中 DDX4 蛋白的变化分析。1'~14'分别
对应 1~14 期的部分区域放大。红色信号为 DDX4 蛋白，绿色信号为 CTNNB1 蛋白，蓝色信号为 DAPI。
Plate Ⅲ The immunofluorescence staining of DDX4 in the gonads at Stage 14 to 20 of the P. sinensis
1-7. the immunofluorescence staining of DDX4 in the ZW female gonads at stage 1-7 of the P. sinensis, 8-14. the immunofluorescence staining of DDX4
in the ZZ male gonads at stage 14-20 of the P. sinensis. 1'-14'. partial enlarged view of 1-14. Red signal is DDX4, green signal is CTNNB1, blue signal is
DAPI.
性腺髓质区的性索结构区域 (图版Ⅲ-12~14)。 生殖细胞分布以及相关基因的表达情况，总结

了 14~20 期胚胎生殖细胞发育图 (图 3)。通常认
2.4 生殖细胞特异性基因表达差异
为 14~17 期为中华鳖胚胎的性别决定时期；17
为了解析中华鳖雌雄胚胎生殖细胞基因表
期以后为中华鳖的性别分化时期。研究发现在
达的差异，对 14~20 期雌雄中华鳖胚胎的性腺
17 期后雌性性腺皮质区增厚，减数分裂相关基
组织进行了转录组分析。在对雌雄性腺中关于
因 Stra8 和 Dmc1 表达显著升高，说明了雌性生
生 殖 细 胞 的 差 异 基 因 进 行 分 析 后 发 现 ， 在
殖细胞进入了减数分裂期。细胞周期停滞基因
18~20 期 ZW 雌性性腺中 Ddx4、Mael (maelstrom
Notch 在中华鳖雄性性腺中 19 和 20 期持续上升，
spermatogenic transposon silencer)、Nanog (nanog
预示雄性生殖细胞可能进入了细胞周期停滞。

homeobox)、 Dazl、 Dnd1、 Stra8 (stimulated by
retinoic acid 8) 和 Dmc1 (DNA meiotic recombin- 3 讨论
ase1) 呈现高表达 (图 1)。在 18~20 期 ZZ 雄性性腺
中，富集到与生殖细胞相关的差异基因有 Rmb38 本实验采用组织学观察，免疫荧光染色和
(RNA binding motif protein 38)、Hes1 (hes family 基因表达分析对中华鳖性别决定期至性别分化
BHLH transcription factor 1)、 Notch (notch rece- 时期雌雄性腺中生殖细胞进行了差异比较。中
ptor) 和 Bcl2 (BCL2 apoptosis regulator)。随后， 华鳖 ZW 雌性性腺在胚胎期 17 期后性腺内部皮
利用 qPCR 对筛选到的基因进一步验证发现， 质区高度发育，生殖细胞集中分布在皮质区；
Dazl、Ddx4、Stra8 和 Dmc1 在 18~20 期 ZW 雌 而 ZZ 雄性性腺在 17 期后性腺内部髓质区高度
性性腺的 mRNA 表达量显著高于 ZZ 雄性 (图 2)。 发育且出现性索结构，生殖细胞集中分布在髓

质性索内。中华鳖性腺发育与其他脊椎动物如
2.5 中华鳖胚胎生殖细胞发育示意图
哺乳类、鸟类、两栖类和鱼类的性腺发育的形
根据中华鳖胚胎发育过程中性腺的形态、 态类似。在成年脊椎动物中，睾丸与卵巢都具

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