Page 8 - 《渔业研究》2025年第6期

第 6 期 覃 盼等： 鱼类锥体虫病研究进展 699

染后 14~21 d 才开始显著升高，提示锥体虫可在早 amplification，LAMP）和多酶恒温快速扩增（Mul-
期通过抑制一氧化氮免疫途径实现免疫逃逸 [36] 。 tienzyme isothermal rapid amplification，MIRA）等，
为实现持久感染，锥体虫还可主动调节宿主免 为现场快速检测提供了新的选择。与传统分子生物
疫系统。T. carassii 表达的钙网蛋白（TcaCRT）可 学方法相比，LAMP 和 MIRA 不需要复杂仪器设
定位于虫体表面并分泌至胞外，特异性结合宿主补 备，可在简单的水浴条件下完成操作。然而，针对
体成分 C1q，从而阻断经典补体通路的激活。实验 鱼类锥体虫的快速检测试剂盒，目前尚无商业化产
表明，重组 TcaCRT 能显著抑制补体介导的红细胞 品上市。针对这一需求，本团队成功开发了基于
溶血，且此抑制效应可被抗 TcaCRT 抗体逆转，表 MIRA−胶体金试纸条的大黄鱼锥体虫检测技术，
明该分子在免疫逃逸中发挥重要作用 [37] 。此外， 其灵敏度可达 2.1 拷贝/μL DNA，无需任何专用设
锥体虫 Hsp70 也被证实具有免疫调控功能，其重组 备，且 20 min 便可获取检测结果。该试剂盒已在
蛋白可激活金鱼巨噬细胞，诱导促炎因子（IFN-γ、 福建、浙江等地十余家养殖企业和科研机构得到应
TNFα、 IL-1β） 和 趋 化 因 子 （ CCL-1、 CXCL-8） 用，为大黄鱼亲鱼及苗种筛选和早期诊断提供了可
的表达，并增强 iNOS 活性和一氧化氮释放。该分 靠支持。
子可能通过诱导过度的炎症反应引发免疫病理，促
8 防控策略
使宿主免疫耗竭，形成有利于寄生虫持续存活的微
[38]
环境 。 药物治疗是控制鱼类锥体虫感染的关键策略。
尽管多个研究团队已开展鱼类锥体虫防治药物的探
7 诊断技术
索，但目前尚无药物获得新兽药证书。四川农业大
鱼类锥体虫病的诊断是防控工作的基础。目 学 汪 开 毓 教 授 团 队 研 究 了 多 种 药 物 对 南 方 鲇
前，常用的诊断方法包括形态学观察和分子生物学 （Silurus meridionalis）锥体虫病的防控效果，包
检测。显微镜镜检是鱼类锥体虫病诊断的传统方 括苏拉明、安锥赛、咪唑苯脲、阿苯达唑、吡喹
法，通过采集疑似患病鱼体的血液样本制备血涂 酮、三氮脒（贝尼尔） 、氯硝柳胺、碘胺类、青蒿
片，并通过吉姆萨染色后，观察虫体形态特征以判 素、常山酮、百部、白头翁、印楝、替硝唑及阿维
定感染情况。基于血涂片的显微镜观察方法操作简 菌素等。结果显示，仅三氮脒（贝尼尔）在疗效、
便，成本低廉，但在潜伏期或感染初期，由于样本 安全性及便捷性方面表现优异。按 1.00~1.36 g/kg
虫体数量较少，容易漏检。为了提高诊断可靠性， 饲料剂量连续拌料投喂 5~7 d 后，鱼类死亡率自第
可采取多次涂片复查，或结合聚合酶链式反应 3 天显著下降，治疗后血涂片中几乎无法检测到虫
（Polymerase chain reaction，PCR）等分子检测方 体，显示出良好的治疗效果 [39] 。在大黄鱼锥体虫
法进行综合判断。 病的药物筛选方面，本团队建立了基于体外培养体
与显微镜镜检相比，分子生物学检测方法在特 系的药物筛选平台。体外测试结果表明，大黄酚、
异性和准确性方面具有明显优势。然而，由于 非昔硝唑、大黄素甲醚与宝霍甘等水产常见抗寄生
NCBI 数据库中尚缺乏完整的鱼类锥体虫基因组信 虫药物（0.1 mg/mL 浓度下）未能有效抑制虫体增
息，分子生物学检测靶标相对有限。目前，国内外 殖。在大黄鱼模型上，笔者团队测试了包括阿苯达
普遍采用 18S rRNA 或线粒体基因作为检测靶标。 唑（4 g/kg）、吡喹酮（3 g/kg）、盐酸氨丙啉 （1 g/kg）、
PCR 不仅具有高灵敏度和特异性，而且其扩增产 青蒿素（4 g/kg） 、伊维菌素（2 g/kg）和三氮脒
物可通过测序与数据库进行比对，进而用于初步的 （1.5 g/kg）等被认为对哺乳动物锥体虫或其他鱼
种属鉴定和遗传进化分析。荧光定量 PCR（Fluo- 类寄生虫有效的药物。遗憾的是，上述药物对大黄
rescent quantitation PCR，qPCR）则可对鱼体中的 鱼锥体虫病并未显示出疗效。值得注意的是，大黄
虫体载量进行定量，从而评估感染进程。尽管分子 鱼锥体虫感染后，易发生继发感染，导致“烂身”
技术克服了显微镜在潜伏期或感染早期样本检测中 情况，使防控难度远高于其他鱼类。根据笔者经
的局限性，但其对设备和操作有一定的要求，且成 验，尽管单一的有效抗锥体虫药物可减少鱼体内虫
本相对较高。 体数量，但无法显著降低死亡率。因此，应在杀虫
近年来，适用于养殖现场的快速检测技术不 基础上进行综合防控，管理继发性感染，缓解贫血

断发展，如环介导等温扩增（Loop-mediated isothermal 并维护机体免疫状态。除化学药物外，抗菌肽在鱼