Page 188 - 《水产学报》2026年第2期

2 期 水 产 学 报 50 卷

干扰素 (IFN) 是宿主对抗病毒感染的关键免 染甲型流感病毒 (FLUA) 后表达水平显著上升，
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疫防御因子之一 ，IFN 可分为四个类型：Ⅰ型 IFN 但 ifi27l2a 敲除系小鼠并未表现出更易感的特性 。
(包括 IFN-α 和 IFN-β)、Ⅱ型 IFN (IFN-γ)、Ⅲ型 IFN 在水产动物中，内质网应激可诱导凡纳滨对虾
[2]
(IFN-λ) 及最新在鱼类中发现的Ⅳ型干扰素 。其 (Litopenaeus vannamei) IFI27 蛋白表达，该蛋白可
中，I 型 IFN 在病毒感染的早期阶段通过激活细 能通过促进病毒感染过程中的细胞凋亡而促进白
胞内的抗病毒反应发挥重要作用，IFN 的快速分 斑综合征病毒 (WSSV) 的复制 [31] 。然而，目前关
泌是启动免疫反应的关键步骤。细胞表面的识别 于鱼类 ifi27l2a 的研究非常有限。
受体 (PRRs) 通过识别病毒、细菌及其他病原体表 草鱼 (Ctenopharyngodon idella) 是淡水养殖中
面的病原体相关模式分子 (PAMPs) 启动下游信号 产量最大的单品经济鱼类，是支撑全国渔业经济
通路 ，激活 Janus 激酶-信号转导和转录激活因 的重要品种，在全球尤其是中国具有重要的经济
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子 (JAK-STAT) 途径，诱导一系列干扰素刺激基 价值。而草鱼呼肠孤病毒 (GCRV) 引起的草鱼出
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因 (ISGs) 的表达 。这些 ISGs 发挥多种抗病毒作 血病是草鱼养殖过程中的主要病害，尤其是幼苗
用，包括抑制病毒的复制、增强细胞的免疫应答、 阶段，感染 GCRV 死亡率高达 80%~90%，给草鱼
诱导细胞凋亡等 [5-6] 。 的养殖产业造成了巨大的经济损失 。目前来说，
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ISGs 是 IFN 信号通路活化后，受 IFN 调控的 抗病育种是解决该病的最根本的方法。因此，研
基因群体。这些基因通过不同的机制帮助宿主抵 究草鱼的免疫调控机制，为草鱼的抗病育种提供
抗病毒感染 [7-8] 。ISGs 通常包括一类具有抗病毒作 科学依据。赤眼鳟 (Squaliobarbus curriculus) 与草
用的酶、转录因子、细胞因子等 [9-11] 。例如，OAS
鱼同隶属于鲤科 (Cyprinidae) 雅罗鱼亚科 (Leucis-
(2′-5′-oligoadenylate synthetase)、Mx 蛋白、PKR 等
cinae)，但在 GCRV 抗性方面，赤眼鳟较草鱼具有
在 IFN 的诱导下能够直接抑制病毒的基因表达和
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更高的抗性 ，但该抗性差异的分子机制尚不清
复制 [12-14] 。其中 ISG15 可直接抑制病毒增殖并调
晰。本研究以草鱼和赤眼鳟为研究材料，克隆二
节宿主的免疫系统 [15-16] ，大西洋鲑 (Salmo salar) 中
者 ifi27l2a 序列，比较分析其序列结构、表达特性
的 Mx1 蛋白可抑制传染性胰腺坏死病毒 (IPNV)
并制备重组蛋白，随后比较分析草鱼和赤眼鳟
[17]
的复制 ，牙鲆 (Paralichthys olivaceus) 的 PKR 蛋
IFI27L2A 的抗病毒功能及其调控机制，旨在为赤
白可抑制大菱鲆 (Scophthalmus maximus) 弹状病
眼鳟和草鱼的 GCRV 抗性差异的分子机制提供线
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毒的复制 。除了抗病毒作用外，ISGs 还参与细
胞凋亡、细胞自噬、溶瘤作用、机体免疫调节等 索，同时重组蛋白的制备也为抗病机制的研究和
生物学过程，形成了一个复杂的免疫网络 [ 4, 19-22] 。 今后的实际应用提供重要手段。
尽管干扰素刺激基因已被广泛研究，但在鱼类中
1 材料与方法
仍有较多干扰素刺激基因的功能尚不明晰。
干扰素 α 诱导蛋白 27 样 2 a (ifi27l2a，也称
1.1 实验动物的养殖及处理
为 isg12b) 是 IFN 刺激基因家族中的一员，属于
ISG12 家族成员，该家族成员包含一段保守的氨 本实验中所用的 1 龄赤眼鳟、草鱼来自湖南
基酸基序 (ISG12 基序) [23-24] 。研究表明，ifi27l2a 省郴州市资兴市水产良种场，规格为 (25±2) g，
的功能与多种免疫反应密切相关，ifi27l2a 或其同 实验前置于循环水养殖系统暂养 2 周，水温控制
源基因在病毒感染条件下表达水平显著上调 [25] ， 在 28℃，活体攻毒所用 GCRV-Ⅱ型毒株 (GCRV-
可通过与其他免疫分子如 IFN、促凋亡蛋白 Bax、 Huan1307) 由中国水产科学研究院珠江水产研究
RIG-I 等相互作用，调控免疫反应 [26-27] 。在哺乳动 所惠赠，攻毒实验采用浸泡法。本研究获得了湖
物中，ifi27 被认为是应答病毒和细菌感染的重要 南农业大学实验动物管理和使用伦理委员会批准，
基因，能够增强宿主的抗病毒能力，并参与先天 实验过程中操作人员严格遵守伦理规范，并按照
性免疫的调节，防止过度炎症反应 [28-29] ，例如 湖南农业大学伦理委员会制定的规章制度执行。
ifi27l2a 可抑制西尼罗河病毒 (WNV) 的感染和发
1.2 样品采集
病 [23] 。但哺乳动物中也有不同的结果，ifi27l2a 在
正常小鼠 (Mus musculus) 的肺中强烈表达，在感 随机选取健康的赤眼鳟、草鱼各 3 尾，解剖

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