Page 30 - 《水产学报》2026年第01期
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1 期 水 产 学 报 50 卷
(图版Ⅱ)。 鱼在第三外显子上产生 7 bp 的碱基缺失,造成移
定量结果显示,pcolcea 基因在 20 dpf 相对表 码突变,第 116 位氨基酸位置提前出现终止密码
达量最低,60 dpf 时相对表达量最高 (图 2-a); 子,导致蛋白质翻译提前终止 (图 3-b)。蛋白结构
pcolceb 基因在 20 dpf 相对表达量最低,之后逐渐 预测显示,移码突变和蛋白质提前终止翻译使得
升高,并在 45 dpf 后表达保持稳定 (图 2-b)。 pcolcea 和 pcolceb 基因所编码的蛋白质结构不完
整,进而造成结构域被破坏。pcolcea -/ - 斑马鱼
2.3 pcolcea -/- 和 pcolceb -/- 斑马鱼突变品系构
的蛋白链长度变短,α-螺旋和 β-折叠明显减少
建和表型分析
(图 3-c),pcolceb -/ - 斑马鱼只编码 115 个氨基酸,
与野生型斑马鱼相比,pcolcea 斑马鱼在第 其蛋白三级结构仅剩 4 个 β-折叠 (图 3-d)。
-/-
一外显子上产生 229 bp 的碱基缺失,造成移码突 Micro-CT 扫描后,对脊椎和肋骨骨密度进行
-/-
变,导致起始密码子后移 (图 3-a)。pcolceb 斑马 分析 (图版Ⅲ),结果表明,pcolcea -/ - 斑马鱼脊椎
300 μm 300 μm 300 μm
1 2 3
300 μm 300 μm 300 μm
4 5 6
图版 Ⅰ pcolcea 和 pcolceb 基因在野生型斑马鱼胚胎发育时期的原位杂交
1~3. pcolcea 基因的表达情况,4~6. pcolceb 基因的表达情况;1、4. 24 dpf,2、5. 48 dpf,3、6. 72 dpf;蓝色三角形. 杂交信号位置。
Plate Ⅰ Whole-mount in situ hybridization of the pcolcea and pcolceb at D. rerio wild-type embryos
1-3. expression of the pcolcea gene, 4-6. expression of the pcolceb gene; 1, 4. 24 dpf; 2, 5. 48 dpf; 3, 6. 72 dpf. Blue triangles. hybridization signal.
500 μm 500 μm 500 μm 500 μm
1 2 3 4
50 μm 50 μm 50 μm 50 μm
5 6 7 8
50 μm 50 μm 50 μm 50 μm
9 10 11 12
图版 Ⅱ pcolcea 和 pcolceb 基因在 60 dpf 野生型斑马鱼尾部组织中的荧光原位杂交
1~4. 尾部组织整体横截面,5~8. 椎骨,9~12. 肌间刺;1、5、9. DAPI,2、6、10. pcolcea,3、7、11. pcolceb,4、8、12. 合并后的表达情况。
Plate Ⅱ Fluorescent in situ hybridization of the pcolcea and pcolceb in 60 dpf wild-type D. rerio tail tissue
1-4. overall cross section of the tail tissue, 5-8. vertebra, 9-12. intermuscular bone; 1, 5, 9. DAPI, 2, 6, 10. pcolcea, 3, 7, 11. pcolceb, 4, 8, 12. expression
of merge.
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