Page 155 - 《水产学报》2025年第6期

程庚，等 水产学报, 2025, 49(6): 069613

育性高、生长速率快、抗逆性强、营养丰富并 的长牡蛎“海大 2 号”四倍体群体提供参考。

可全年上市等优点备受产业关注，已成为牡蛎
育种工作的重要部分 [2–4] 。然而，通过化学试剂 1 材料与方法

抑制二倍体牡蛎极体释放获取的三倍体牡蛎幼
1.1 实验材料
虫死亡率高、倍性不稳定 [5–8] 。目前，通过二倍
实验材料为长牡蛎“海大 2 号”二倍体、三
体牡蛎和四倍体牡蛎杂交可获得 100% 三倍体
倍体及四倍体群体的 1 龄种贝，均取自山东荣
牡蛎 。因此四倍体牡蛎的培育是三倍体牡蛎
[9]
规模化生产的关键。 成桑沟湾养殖海区。3 种种贝均在 5 月初转移
至烟台莱州育苗场进行室内人工促熟，促熟水
目前共有三种途径能够获得四倍体牡蛎：
温 22~24 °C。促熟期间每日投喂足量新月菱形
途径Ⅰ是使用二倍体牡蛎卵子与二倍体牡蛎精
藻 (Nitzschia closterium)，每日换水 2 次。6 月
子 (2n♀+2n♂) 受精抑制第一极体释放来诱导四
底 3 种种贝性腺基本都发育成熟。实验前对“海
倍体 [10–11] ，该途径无需三倍体牡蛎亲本，育种
大 2 号”三倍体、四倍体群体亲贝进行倍性检测，
周期短；途径Ⅱ是在三倍体牡蛎卵子与二倍体
挑选性腺饱满的个体进行诱导实验。
牡蛎精子 (3n♀+2n♂) 受精过程中抑制第一极体
的释放来获取四倍体牡蛎 [12–14] ，该途径四倍体 1.2 精卵获取与受精
牡蛎诱导率高，为四倍体诱导的最主要途径，
长牡蛎“海大 2 号”二倍体、三倍体和四倍
[2]
而三倍体牡蛎怀卵量低限制了其应用 ；途径
体亲本群体的生物学数据如表 1 所示。通过人
Ⅲ是使用二倍体牡蛎的卵子与四倍体牡蛎的精
工解剖获取二倍体、三倍体和四倍体的配子，
子 (2n♀+4n♂) 受精并抑制受精卵第二极体释放
光学显微镜下辨别雌雄，挑选卵子呈卵圆形且
获取四倍体牡蛎 [15–16] ，由于二倍体牡蛎怀卵量
颜色均一的个体为母本，精子活力高的个体为
高，该途径能够获得更多稚贝。目前，细胞松
父本。保留二倍体中的雌性和雄性个体，三倍
弛素 B (CB) 和 6-二甲基氨基嘌呤 (6-DMAP) 为
体中的雌性个体以及四倍体中的雄性个体。镜
四倍体牡蛎主要诱导剂，但化学药物毒性大、
检后把雌雄个体分开放置避免意外受精并及时
价格昂贵且幼虫存活率低 [12,14] 。此外，低渗可影
弃掉雌雄同体。使用 260 目筛绢网过滤卵子去
响牡蛎受精卵减数分裂活动，因此也常用于三
除组织块及杂质，随后置于 25 °C 砂滤海水
倍体和四倍体牡蛎的诱导 [17–19] 。与化学药物诱
中熟化 1 h，弃上清液备用，精子于受精前 10
导相比，盐度诱导具有价格低廉、无毒和环保
min 挤出并经 300 目筛绢网过滤杂质后备用。
的优点。
人工授精前镜检卵子是否污染，人工授精后在
长牡蛎“海大 2 号”新品种是以野生群体中
显微镜视野下保证每个卵子周围有 10~20 个精
左右壳均为金黄色的个体为基础群体，经家系
子。本研究获得了中国海洋大学实验动物管理
选育和群体选育培育而成，具有生长快速、双
和使用伦理委员会批准，实验过程中操作人员
壳为金黄色等特点 [20] 。本研究以长牡蛎“海大
严格遵守中国海洋大学伦理规范，并按照中国
2 号”为实验材料，研究了不同 CB 和盐度诱导
海洋大学伦理委员会制定的规章制度执行。

处理及三种诱导途径对长牡蛎“海大 2 号”四倍
体诱导率的影响，旨在探索长牡蛎“海大 2 号” 1.3 CB 和低渗诱导四倍体实验设计
四倍体的最佳诱导条件，为培育遗传背景丰富 实验水温严格控制在 (25.0 ± 0.5) °C，参考

表 1 长牡蛎“海大 2 号”二倍体、三倍体及四倍体亲本生物学数据
Tab. 1 Biological characteristics of diploid, triploid and tetraploid broodstock in C. gigas “Haida No.2”
亲本 壳高/mm 壳长/mm 壳宽/mm 湿重/g
brookstock shell height shell length shell width wet weight
二倍体 diploid 79.71 ± 5.02 49.45 ± 4.47 25.84 ± 3.78 55.36 ± 6.62
三倍体 triploid 87.40 ± 5.39 49.66 ± 5.03 28.97 ± 4.51 66.06 ± 11.65
四倍体 tetraploid 60.45 ± 6.03 41.14 ± 3.82 23.43 ± 5.90 30.92 ± 5.64

https://www.china-fishery.cn 中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries
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