Page 12 - 《中国药科大学学报》2026年第1期
P. 12

6                         学报   Journal of China Pharmaceutical University 2026, 57(1): 1 − 10  第 57 卷


               光（如紫外线或蓝光）来激活光催化剂，而这些波长                          A            CH 2 OH         CH 2 OH       CH 2 OH
                                                                           O               O             O
               在生物组织中的穿透能力较弱，限制了其在深层组                                   O  O  OH        O  O  OH      O  O  OH
                                                                            OHOH           O  O          N  N
               织或活体动物中的应用。因此，未来                 PPL  技术的改                                  NH 2 NH 2     NH NH
                                                                                           NH NH
                                                                                                         B  B
               进方向包括开发更长波长（如近红外光）可激活的                                                      B  B
               光催化剂，以拓展其在体内标记中的应用潜力。                                      Oxidation      Coupling
                3    基于糖蛋白的捕获
                                                                B          ManNAz-P             Azidosugar
                                                                              O
                    在蛋白质通过内质网和高尔基体系统合成并                                       S                   N 3  N 3
                                                                           O  O  O  N 3
               转运至细胞表面或分泌的过程中，会发生一系列酶                                     O  P  O  HN O
                                                                       O  S  HO HO  OAc
               促糖基化修饰，最终超过           85%  的细胞外蛋白都会带
                                      [22]
               有不同形式的糖基化修饰 。这些修饰不仅在蛋白
               稳定性、结构折叠和细胞信号传导中发挥重要作用，
               还可作为疾病标志物和药物靶点 。目前，已经开
                                             [22]
                                                                            N 3
                                                                                     N 3  N 3
                                                                         N 3
               发了多种靶向糖基化部分的表面蛋白表征方法 ，                                       N 3       N 3  N 3
                                                          [44]
               其中化学标记策略利用特异性化学探针识别糖基                                      N 3            N 3
                                                                Figure 4    Mechanism of glycoprotein capture
               化基团，并通过生物素化等方式进行表征。而糖代                           A:  Cell  surface-capturing  (CSC)  technique  labels  biotin  onto  cell
               谢标记方法则通过提供带有化学修饰基团的糖类                            surface proteins by the reaction of biotin hydrazide with the aldehyde
                                                                or ketone group；B: N-Acetylmannosamine 6-phosphate (ManNAc-6-
               似物，使其在糖基化过程中被细胞利用，从而实现                           P) bypasses the sialic acid pathway to rapidly integrate azide groups
               糖基化蛋白的特异性标记和富集。这些技术的应                            onto glycoproteins
               用极大地促进了细胞表面糖基化蛋白的系统解析。                           模 拟 物   MEK S218D/S228D  以 及 肉 豆 蔻 酰 化  AKT myr  的
                3.1    化学糖捕获方法                                  6 种子代细胞，并采用          CSC  技术捕获    N-糖基化蛋
                    2009 年，研究者提出了一种基于             N  端糖基化       白，共鉴定出      654 种细胞表面蛋白。进一步研究发

               的糖肽捕获策略细胞表面捕获技术（cell surface-                    现，不同致癌基因的独立表达可引起表面蛋白的相
               capturing，CSC），该方法通过预先氧化表面蛋白上                    似或相同变化，并在肿瘤免疫逃逸和转移中发挥不
               的糖基，生成大量醛基和酮基，随后使用生物素酰                           同作用，为药物和生物标志物的发现提供了潜在的
               肼（biotin hydrazide，BH）与其共价交联，并进行酶                表面靶点及其组合。
               解，最终富集       BH  以获取带有糖基化修饰的肽段                        胰腺导管腺癌中的胰腺星状细胞可通过旁分
               （图  4-A）  [45] 。该方法在首次应用时仅能鉴定出                   泌途径分泌白血病抑制因子（leukemia inhibitory
               110 种蛋白质，但其中        104 种被标记为表面蛋白，特              factor，LIF），并与肿瘤表面的        LIF  受体及其共受体
               异性高达     95%。利用     CSC  技术，研究者对       47 种人     IL-6 信 号 转 导 物 （ interleukin  6  signal  transducer，
               类细胞和      31 种小鼠细胞的表面糖蛋白进行了表                     IL6ST）结合，激活      STAT3 信号通路，促进肿瘤免疫
                                                                           [49]
               征，鉴定出     1 492 种人类细胞蛋白和        1 296 种小鼠细       逃逸与增殖 。基于           CSC  技术发现的     LIF  抗肿瘤
               胞蛋白，其中       1 039 种人类蛋白和      881 种小鼠蛋白         靶点展现出了极具潜力的临床价值。2023 年，
               被确定为高置信度表面蛋白，其余蛋白可能也具有                           LIF  单抗  JAB-BX300 在中国获批新药临床试验申
                        [46]
               跨膜区域 。CSC        技术凭借其强大的糖蛋白捕获                   请，将在中国开展Ⅰ/Ⅱa 期晚期实体瘤临床试验。
               能力，助力研究人员发现了多种潜在的生物学靶                            JAB-BX300 在人源化胰腺癌异种移植小鼠模型中
               点，如   CD72 和  CC  基序趋化因子受体        10（C-C motif   表现出显著的抗肿瘤活性。
               chemokine receptor 10，CCR10）分别被发现是恶性                  Shi 等 [50]  利用生物素-酰肼探针结合高碘酸钠
                                                [47]
               B  细胞瘤和多发性骨髓瘤的治疗靶点 。                             预氧化糖蛋白的糖链，对            N-糖基化蛋白进行富集，
                    Leung 等 [48]  利用人正常乳腺上皮细胞       MCF10A，     揭示了胰腺导管腺癌中基质细胞与肿瘤细胞间通
               通过慢病毒技术分别构建了携带致癌基因                      HER2     过  PDGFR-PTPN11-FOS   信号轴的相互作用，并发
               过表达、EGFR      L858R 、KRAS G12V 、BRAF V600E 、磷酸化  现基质细胞表面的金属蛋白酶介导的                  AXL  受体酪
   7   8   9   10   11   12   13   14   15   16   17