Page 35 - 《渔业研究》2026年第3期
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328 渔 业 研 究 第 48 卷
2.5 AciHV 特异性 PCR 检测 下 , 针 对 AciHV-1 终 止 酶 基 因 ter( 图 6A) 及
6 尾患病杂交鲟(S1~S6)的肝脏及肾脏 DNA AciHV-2 DNA 聚 合 酶 基 因 dna pol( 图 6B) 的
模板的电泳检测结果如图 6 所示。S1~S6 均能扩增 PCR 检测结果均为阴性。上述结果表明,6 尾患病
出与 AciHV-3 MCP 基因预期大小(536 bp)相符 杂交鲟均为 AciHV-3 单一感染,排除了 AciHV-1
的特异性条带,且条带清晰、单一(图 6C) 。相比之 和 AciHV-2 感染的可能性。
长度/bp
Length M S1 S2 S3 S4 S5 S6 NC M S1 S2 S3 S4 S5 S6 NC M S1 S2 S3 S4 S5 S6 NC
2 000
AciHV-3 536 bp
1 000
750
500
250
100
AciHV-1 A AciHV-2 B AciHV-3 C
图 6 不同患病杂交鲟 AciHV 特异性基因 PCR 检测电泳图
Fig. 6 Electrophoresis of PCR detection of AciHV specific gene from different diseased A. baerii ♀×A. schrenckii ♂
注:A. AciHV-1 检测结果;B. AciHV-2 检测结果;C. AciHV-3 检测结果。M. DNA 分子质量标准物(2 000 bp) ;
S1~S6. 分子质量标准物检测样本;NC. 阴性对照,以超纯水作为模板。
Notes: A. Detection results of AciHV-1; B. Detection results of AciHV-2; C. Detection results of AciHV-3. M. DNA marker
(2 000 bp); S1–S6. Test samples; NC. Negative control, ultrapure water is used as the template.
为进一步验证病原真实性,按照 1.7 方法随机 AACCTTCTCCAGCGTGTGCTGTGGGTCGTTGG
选取一个 PCR 阳性产物(S2)进行 TA 克隆及双 CTTTGTCAAACTCGTGCTCGTAGTAGCGGATG
向测序,测序结果如下: AACAACAGTTGGATCAAAGGGTCTGAGAACC
TGTAGATGCCCAGGCCCTTCAGGCCAGT CCAGGTGAATCCCGTCGTTGGAGTTGGCGTTG
CTGCACCAGTGACTGTGCCTCGTCGACCCGA CGCGGCAAGTCCACCATGGGTTGCAACATCCG
TAGGGCTTGAAATGCAAGACGCGGTTCGTGA CCGCCGGTCGAAGATGTTCTCGTTGACCTTTTC
TCCACGGCGTCACGCACAGCGTGTAATACTT GACCCAGTACTTGAGTATGGCCGCGTCTTTGA
GATGAACAGGGACTGGGTTTCCGTTAGGCCT AATGG
TCGGTGGCCGCGCGTGGAACGGGGTTTACGA BLAST 分析显示,该序列与 AciHV-3(登录号:
ACAGCTGGTGGATTTCGAGGATCTGTGCCAG OV754656.1、OR242753.1)有较高的同源性。基
GGAATGGTGGAGACCTCCCGTGCACCCGAGG 于 MCP 基因构建的系统发育树显示,S2 与 AciHV-3
CTGGTGAACAAATGCTCGTGGGTCTGTAGAA 聚为一簇(图 7) ,进一步明确了其作为 AciHV-3
TGGTCTTCAGCCCACACCTGAGCAAGATGAA 成员的分类地位。
89 鲟疱疹病毒 2 型 AciHV-2 KY440364.1
99 鲟疱疹病毒 2 型 AciHV-2 AY874417.2
23 鲟疱疹病毒 2 型 AciHV-2 EF685906.1
鲟疱疹病毒 1 型 AciHV-1 OP729415.1
21
100 鲟疱疹病毒 1 型 AciHV-1 OK275733.1
65
鲤疱疹病毒 3 型 Cyprinid herpesvirus 3 AB375391.1
鲤疱疹病毒 2 型 Cyprinid herpesvirus 2 OR123892.1
S2
鲟疱疹病毒 3 型 AciHV-3 OV754656.1
100 鲟疱疹病毒 3 型 AciHV-3 OR242753.1
2.00
图 7 基于 AciHV MCP 基因序列构建的系统发育树
Fig. 7 Phylogenetic tree constructed based on the MCP gene sequences of AciHV
2.6 临床样本病原筛查与共检出分析 66.7%(4/6) (表 3) 。进一步分析发现,S1、S2、
在所采集的 6 份杂交鲟临床样本中,AciHV-3 S5 及 S6 样本表现为病毒与细菌的共同阳性,占受
的检出率为 100%(6/6) ,海豚链球菌的检出率为 检样本的 66.7%(4/6);而 S3 和 S4 仅检出 AciHV-3

