Page 28 - 《渔业研究》2026年第1期
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第 1 期                朱威霖等： 克氏原螯虾繁殖周期及选育新品系遗传多样性分析                                       25

              周期的系统研究相对较少，缺乏科学依据来指导亲                           健全的个体组建育种核心群（F ） ，选留的个体体
                                                                                           0
              本选育和苗种生产。尽管已有学者通过分子标记技                           质量高于相同性别基础群平均体质量                  15%  以上，
              术对克氏原螯虾的遗传多样性进行了初步探索                     [5-6] ，  根据基础群体质量大小频率分布情况调整选留率，
              但针对广西地区选育的克氏原螯虾新品系的遗传多                           并间接控制选择强度，要求选留的核心群雄虾体
              样性分析仍存在较大研究空白。由于群体选育的克                           长≥8.5 cm，雌虾体长≥8.0 cm，核心群个体数不少于
              氏原螯虾新品系种质资源遗传背景不清，遗传多样                           1 200  尾，雌雄比例为     2∶1，按    450 kg/hm 的密度
                                                                                                    2
              性水平未知，因此其难以被进行有效的遗传改良和                           放养核心群个体。
              新品种选育。本研究旨在通过对广西地区克氏原螯                               从基础群中挑选虾体健壮、附肢健全的个体组
              虾繁殖周期的系统研究，明确其繁殖规律，为亲本                           建  F 对照群，不做生长表型指标选择，放养密
                                                                  0
              选育和苗种生产提供科学依据。同时，通过分子标                           度、雌雄比以及养殖条件与核心群一致。
              记技术对通过群体选育获得的克氏原螯虾新品系的                            1.2.3 小龙虾新品系群体继代选育
              遗传背景和多样性水平进行检测与评估，为选育适应                              从上一代选育群（核心群）中，选择体质量超
              广西本地环境条件和市场需求的新品系奠定基础。                           过群体均值      15%  以上的亲本虾组建新一代育种
               1 材料与方法                                         群，要求虾体健壮、附肢健全，群个体数不少于
                                                                                         2
                                                               1 200  尾，种亲虾按    450 kg/hm 的密度投放，雌雄
               1.1 性腺样品采集                                      比为  2∶1，繁殖子代养殖日龄为            150 d，测量核心
                  2022  年  7  月—2023  年  6  月，每月  15  日左右前
                                                               群个体体质量。对照群个体来自上一代选育群，但
              往广西南宁市良庆区大塘镇润爽克氏原螯虾养殖基
                                                               不做体质量指标选择。
              地采集湖南岳阳种群同一世代小龙虾样本，每次采
                                                                1.3 遗传多样性分析样品采集
              集雌虾与雄虾各        30  尾左右，采样后测量体长和体
                                                                   从广西南宁市良庆区大塘镇润爽克氏原螯虾
              质量。解剖后，分别采集性腺和肝胰腺组织，测定
                                                               养殖基地选育的克氏原螯虾埃及（AJ）新品系
              其重量，性腺指数和肝胰腺指数按以下公式计算：
                                                               F 和 0  F 、湖南岳阳（YY）新品系          F 和 0  F ，以及
                                                                     3
                                                                                                    3
                  性腺指数＝性腺质量（g）／体质量（g）×
                                                               湖北潜江（QJ）新品系           F 和 0  F 群体中，分别取
                                                                                           1
              100%                   （1）
                                                               样  50  尾虾，提取    DNA，经克氏原螯虾         12  个微卫
                  肝胰腺指数＝肝胰腺质量（g）／体质量（g）×
                                                               星位点特异性引物        [5]  扩增后，送至南京集思慧远
              100%                   （2）
                                                               生物科技有限公司进行测序。
                  同时记录克氏原螯虾的卵巢颜色、卵巢大小和
                                                                1.4 新品系的遗传多样性分析
              形态特征。克氏原螯虾性腺指数的周年变化明显，
                                                                   使用  GenAlEx（6.51b2）软件计算单个         SSR  位
              借鉴李胜等      [7]  和黄瑾等 [8]  的分类方法，将雌性克
                                                               点在样本整体的等位基因数（Number of alleles，
              氏原螯虾的卵巢发育划分为             5  个期相，根据每期卵
                                                               N ） 、有效等位基因数（Effective number of alle-
              巢的显著特征，对每个月份采集的样本进行阶段划                            a
                                                               les，N ） 、观测杂合度（Observed heterozygosity，
              分，描述各阶段卵巢的典型形态特点，并对每个阶                                e
                                                               H ）和期望杂合度（Expected heterozygosity，H ） 。
              段样本所占的比例进行百分比统计。广西壮族自治                            o                                       e
              区水产科学研究院科学伦理委员会批准动物实验，                           使用  PopGene（v1.32）计算各位点遗传分化系数
              批准编号为      2025-GAFS-01。                         （Genetic differentiation coefficient，F ） 。使用  Po-
                                                                                               st
               1.2 新品系的选育                                      werMarker（v3.25）软件中的      Summary Statistics 功
               1.2.1 育种基础群的建立                                  能计算各位点的多态性信息含量（Polymorphism
                  引进种群经过暂养，淘汰弱小个体，挑选虾体                         information content，PIC）。采用  PowerMarker（v3.25）
              健壮、附肢健全个体按种源分别建立基础群，在育                           进行群体遗传聚类分析，基于等位基因频率计算
              种池养殖，放养密度为           450 kg/hm ，平均体质量达           Nei’s（1983）遗传距离，并通过非加权平均法（Un-
                                            2
              到  30 g  以上后，以体质量作为主选评价指标，测                      weighted  pair  group  method  with  arithmetic  mean，
              量基础群个体体质量，确定其建群个体选择截点。                           UPGMA）构建聚类树图。应用             GenAlEx 6.51b2  软
               1.2.2 育种核心群的建立                                  件进行分子水平遗传变异分析，采用分子方差分析
                  按选择截点和性别从基础群中选择健壮、附肢                         法（Analysis of molecular variance，AMOVA）评
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