Page 57 - 《水产学报》2025年第7期

魏涛，等 水产学报, 2025, 49(7): 079605

暗区
挡板 dark area
活板门
baffle 镜面
trapdoor
mirror
明区
bright area
(a) (b) (c)
图 2 鱼类行为观察水槽简图
(a) 个性行为观察实验水槽，(b) 好斗性实验观察水槽，(c) 焦虑性实验观察水槽。
Fig. 2 Diagram of fish behavior observation tank
(a) observation tank of personality behavior, (b) observation tank of aggression behavior, (c) observation tank of anxiety behavior.
量统计实验鱼游出遮蔽区的次数以及在开阔区 考相关鱼类行为学研究方法 ，将攻击行为细
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的停留时间比 (%)，以此评估实验对象的勇敢 化为以下 3 个量化指标：①撞击：快速游向镜
性行为模式。 面并发生明显身体接触；②威胁展示：快速游

探索性 勇敢性测试完成后，将实验鱼 向镜面后返回起始位置，无实质性接触；③示
转移至遮蔽区内，闭合隔离小门，并在开阔区 威展示：在 0.5~1.5 倍体长距离内呈现鳃盖扩张、
远端 (距边缘 15 cm 的中心位置) 设置一个内径 背鳍竖立及身体摆动等示威姿态。

4 cm 的 PVC 直角管 (开口方向背向遮蔽区)。待 焦虑性 本研究采用改良的黑白箱法测
实验鱼在遮蔽区适应 20 min 后，缓慢开启隔离 试。实验装置为特制的 PVC 行为观察箱 (40 cm ×
小门，同时进行为期 20 min 的连续行为录像。 20 cm × 20 cm)，通过内部隔板将箱体均分为两
视频分析阶段，采用专业行为分析软件量化评 个等容积的测试区域：暗区 (各立面及底部均覆
估实验鱼的探索行为，具体记录两项指标： 盖黑色 PVC 板) 和明区 (各面均为白色 PVC 板)。
①首次接近陌生物体所用时间比 (%)，反映个 正式实验时，将单尾实验鱼置于暗区起始位，
体对新异刺激的探索倾向；②距离陌生物体的 适应 1 min 后开始 30 min 的行为录像。视频分
平均距离 (cm)，用于表征实验鱼的风险回避 析中以实验鱼停留在明亮区域的时间比 (%) 作
程度。 为焦虑评价指标。

活跃性 在探索性实验结束后，立即移
1.5 生理指标测定方法
除 PVC 直角管，确认所有实验鱼均位于开阔区
后降下隔离小门，使其在无外界干扰条件下恢 将实验鱼置于 MS-222 (200 mg/L) 溶液中进
复 10 min。随后进行活跃性测试，通过高清摄 行麻醉。麻醉完成后，使用经肝素抗凝剂润洗
像系统连续记录实验鱼 10 min 内的自发游泳行 的 1 mL 注射器于尾静脉取血。采集的血液样品
为。视频分析阶段，量化实验鱼在开阔区域的 分成 2 份，一份用于测定红细胞比容 (Hct)，另
移动时间比 (%)，作为评估个体活跃程度的行 一份以 10 000 r/min 离心 10 min，之后收集上清
为参数。 液−80 °C 下冷冻保存，用于测定总蛋白 (TP，

好斗性 本研究采用镜像斗争测试法评 A045-2-2) 和葡萄糖 (GLU，F006-1-1)。测定的
估许氏平鲉的好斗性行为。实验装置为特制的 免疫指标包括酸性磷酸酶 (ACP，A060-1-1)、碱
白色 PVC 行为观察水槽 (40 cm × 20 cm × 20 cm)， 性 磷 酸 酶 (AKP， A059-1-1) 和 溶 菌 酶 (LZM，
水槽中央垂直安装双面镜将其均分为两个独立 A050-1-1) 活性。测定的抗氧化指标包括丙二
区域，镜面外覆可移动的黑色遮光板。正式实 醛 (MDA，A003-1-2)、超氧化物歧化酶 (SOD，
验前，选取体型相近的 2 尾实验鱼分别置于水 A001-3-2) 和过氧化氢酶 (CAT，A007-1-1) 活性。
槽两侧区域，适应 30 min 后移除遮光板，使实 Hct 使用微量毛细管离心法测定，其他生理指
验鱼通过镜面产生同类视觉刺激，同时使用高 标均使用试剂盒 (南京建成生物工程研究所) 按
清摄像系统连续记录 30 min 内的攻击行为。参 说明书进行测定。

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