Page 189 - 《水产学报》2025年第6期
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周梓华,等                                                                 水产学报, 2025, 49(6): 069616


                                         表 1    太阳长棘海星亲本的规格及生殖排放过程
                                  Tab. 1    The size of parent A. solaris and their gamete release process
                  序号         性别           中央盘直径/ cm           注射时间           产卵/排精起始时间           持续时间
                   no.      gender      diameter of central disc  injection time  releasing time  duration
                   1          ♀               13.0              20:47            21:15           40 min
                   2          ♀               12.8              20:55            21:09           50 min
                   3          ♀               11.4              23:16            23:36           34 min
                   4          ♂               9.0               21:13            21:23           1 h 35 min
                   5          ♂               11.1              21:24            21:48           1 h 40 min
                   6          ♀               10.5              22:45

                   另外,设计一变态附着实验:将实验获得                          卵子和    2  个父本的精子。待产卵结束后将父/母
              的有腕幼虫分成两批,分别放置于无附着基                       (空     体转移离开。人工授精前检查卵子发生泡是否
              白底缸) 和有附着基          (珊瑚石) 的实验培养缸中,               破裂,待发生泡破裂,将经镜检鉴定活跃的精
              数天后,分别统计幼虫的变态率。                                  子加入卵子缸中,前期加入少量精子,后续根

                                                               据卵子的受精镜检结果             (初级卵膜出现与否),
              1.3    性别鉴定
                                                               视情况以“多次少补”的形式补充精子                 (图  2),直
                   借助   5 mL  的注射器辨别长棘海星的性腺
                                                               至镜检视野里所有卵子受精。为防止精子污染,
              发育时期和雌雄性别。将             5 mL  注射器扎入长棘
                                                               每步操作前均用淡水清洗双手和实验工具。

              海星腕部的基底处,抽取性腺                1 mL  并放置于光
                                                               1.5    受精孵化
              学显微镜下观察,若有卵径为                200 μm  的卵子即
              可判断为可用于繁殖的雌性个体;性腺发育时                                 受精后,将子代群体平均分为                3  个实验组,
              期由性腺分叶        (gonad lobe) 的颜色和卵子的个体             每组实验均微曝气培养。太阳长棘海星在                      28~
              形状、大小以及精子的活力辅助判断。共挑选                             31 ℃、盐度 30~35、pH 8.0~8.3      条件下的孵化
              成熟期的     4  雌  2  雄个体开展实验      (图  1)。           时间约    48 h (表  2),孵化期间,若由于受精卵密
                                                               度过大,受精卵聚团并附着于养殖缸底部时,

                                                               提高搅拌频率,以提高孵化成功率。经过受精
                                                               卵、第一极体、第二极体、2             细胞期、4     细胞期、
                                                               多细胞期、桑葚胚期、囊胚期、原肠胚期等发
                                                               育阶段,孵化至早期羽腕幼虫                (表  2)。孵化后,
                                                               保持浮游幼虫密度在2 个/mL。
                        1 cm

                           (a)                 (b)             1.6    浮游幼虫培养
                              图 1    雌雄性腺                          将  3  组实验浮游幼虫通过虹吸的方式,抽
              (a) 雌性,(b) 雄性。
                                                               滤至   150  目的筛绢网上选优培养。选优后,3
                   Fig. 1 Female and male gonad of A. solaris
                                                               组实验幼虫分别混合均匀并移至室内的培养缸
              (a) female, (b) male.
                                                               中,同样保持微充气培养,保持温度在                     29 ℃。

                                                               培养期间,根据实验设计,每天投喂足量的牟
              1.4    配子排放
                                                               氏角毛藻和市场上销售的牟氏角毛藻藻粉,早
                   将亲本分别单独放置于养殖缸中培养。用                          晚共投喂     2  次。为保证培育过程无杂质混入,
              2%  浓度的    NaCl 溶液配制     1 mmol/L  的  1-甲基腺      饵料投放前,均用          200  目的筛绢网过滤,以滤
              嘌呤   (1-methyl-adenine,购于上海麦克林生化科                掉藻粉残渣和藻类分泌物。实验期间全程全/半
              技股份有限公司) 催产剂             [15, 18] 。将新鲜配制的        遮光培养,每隔         3  天更换   1  次海水,换水前,
              10 mL  催产剂注入雌性个体的腕足基部位置,                         抽取   10 mL  海水,计算浮游幼虫个体密度、孵
              片刻后,收集精卵配子。分开收集                   4  个母本的        化率和畸形率,每组实验测量                3  次;同样抽取

              中国水产学会主办  sponsored by China Society of Fisheries                          https://www.china-fishery.cn
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