Page 179 - 《水产学报》2023年第1期

姜鹏飞，等 水产学报, 2023, 47(1): 019113

78 斑节对虾 P. monodon
99 凡纳滨对虾 L. vannamei

100 日本对虾 P. japonicus

中华绒螯蟹 E. sinensis
100 三疣梭子蟹 P. trituberculatus

斑马鱼 D. rerio

人 H. sapiens
0.20 100 小鼠 M. musculus

图 1 中华绒螯蟹与相关物种 Scarb1 的氨基酸序列系统树

Fig. 1 Phylogenetic tree of E. sinensis and other relative species based on amino acid sequences of Scarb1 gene
表达量均最低 (图 2-a , b, c)。 生长性状进行关联分析，发现 SNP C432T 的 TT
从蜕壳周期看，Scarb1 在肝胰腺、心脏和肌 基因型的蜕壳后增重率和壳长增长率都显著高于
肉均是蜕壳后期的表达量最高，然后是蜕壳前期， TC 和 CC 基因型 (P < 0.05)，而壳宽增长率没有显
蜕壳间期的表达量最低，但均不存在显著的统计 著差异 (P > 0.05)。而另 2 个位点 (SNP C672T 和
差异 (P > 0.05)(图 2-d, g, i)；在鳃与肠道的表达量 SNP G684T) 的基因型与生长相关性状均没有显著
均在蜕壳间期显著高于蜕壳前期与蜕壳后期 (P < 的关联性 (表 2)。
0.05)(图 2-e, h)；而在血淋巴细胞中的表达量是从 将 SNP 位点与 3 个生长相关性状进行百分位
蜕壳前期，到后期和间期逐步降低，但没有显著 排序分析，发现 SNP C432T 的 TT 基因型的数量
差异 (P > 0.05)(图 2-f)。 在生长性状的百分比区间内，从低到高呈现上升
趋势 (图 4-a, d, g)。而 SNP C672T 和 SNP G684T，
2.3 RNA 干扰效应研究
以及 SNP C432T 的其他基因型在百分比区间没有
经 15 d 干扰，实验蟹的肝胰腺颜色较对照组 表现出增加或降低的规律性 (图 4)。
变浅 (图 3-a)，其类胡萝卜素含量 [(7.37±1.19) mg/kg]
3 讨论
较对照组 [(9.91±2.90) mg/kg] 下降 25.64%(图 3-b)。
组织观察发现，15 d 干扰后的基膜 (Bm) 完整，肝
本研究获得中华绒螯蟹 Scarb1 的 CDS 全长
胰腺肝小管管腔 (Lu) 腔壁出现模糊状，细胞排列
为 2 415 bp，共编码 805 个氨基酸，具有一个 B
开始紊乱 [20-22] ；而对照组肝胰腺的基膜完整、肝
类清道夫受体的 CD36 结构域，与三疣梭子蟹氨
小管管腔清晰、细胞无坏死解体现象。15 d 干扰 基酸同源性高达 80.51%，表明该基因在不同物种
组的肠道内膜肌肉层和黏膜下层处出现明显的空 间具有较高的保守性，有较为重要的生物学功能。
洞现象 (图 3-c)。 组织时空表达分析发现，该基因在肝胰腺、肠道
经 30 d 干扰，实验蟹的肝胰腺颜色变为灰白 和血淋巴细胞中高表达，且在蜕壳间期的肠道中
色 (图 3-a)，其类胡萝卜素含量 [(4.03±2.18) mg/kg] 高表达，可能是因为肠道作为重要的消化器官，
较对照组下降 59.36% (图 3-b)。组织观察发现， 并通过 Scarb1 介导吸收脂质 [23-25] 与脂溶性类胡萝
肝胰腺肝小管管腔腔壁模糊状加剧并产生了部分 卜素 [26-27] ，为中华绒螯蟹的生长积累能量。在蜕
空泡化结构，细胞排列紊乱增多；肠道内膜肌肉 壳各时期的血淋巴细胞中较平均表达，表明该基
[28]
层和黏膜下层处的空洞变得更大 (图 3-c)。 因在脂质转移过程中发挥作用 。蜕壳后期肝胰
腺中 Scarb1 表达量有明显升高现象，这可能是河
2.4 SNP 标记筛选与生长性状的关联分析
蟹刚完成蜕壳，急需通过 Scarb1 介导将脂类转运
对 175 个中华绒螯蟹样本的 Scarb1 进行扩增 到肝胰腺 [29-31] ，并分解代谢产生能量，以满足蜕
和测序，在第 1 外显子上鉴定到 3 个 SNP 位点 壳后的生长发育。总的来说，在中华绒螯蟹体内，
(C432T、C672T、G684T)。将此 3 个 SNP 位点与 肠道内 Scarb1 可能介导脂质的吸收，并通过血淋

https://www.china-fishery.cn 中国水产学会主办 sponsored by China Society of Fisheries
4