Page 25 - 《渔业研究》2025年第3期

282 渔 业 研 究 第 47 卷

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1

水车（减速机）
配水箱 水泵 Waterwheel (reduction gear) 出水溶解氧测定点
Water distribution Water pump 水流方向 Spotting for outlet water DO
tank 进水管 Water direction 进水溶解氧测定点 转动方向 出水口
Inlet pipe Spotting for inlet water DO Direction of rotation Water outlet

图 1 实验装置俯视图
Fig. 1 Top view of experimental device

注：1~8 为塑料筐，分别模拟单个水平潜流湿地。
Note: 1−8 are plastic baskets to respectively simulate a single horizontal subsurface flow wetland.
1.3 样品采集与测定
蕹菜
I. aquatica
1.3.1 水样的采集
细河沙
5 cm 每天于 8:00、12:00、17:00 采集人工湿地系统
River sand
无烟煤
15 cm 内的水样，采样点位为水车叶轮后方，共检测 4 d。
Anthracite
采用 1 L 聚乙烯瓶收集后，带回实验室并测定污染
图 2 水平潜流人工湿地系统剖面图 +
物浓度，污染物检测指标包括 TP、TN、 NH -N、
4
Fig. 2 Horizontal subsurface flow constructed wetland
NO -N、 NO -N、COD。水样检测方法如表 4 所示。
−
−
2 3
system profile
1.3.2 基质样品的采集

表 1 无烟煤与细河沙的理化性质
使用 20 mL 离心管收集湿地基质，并在预实
Tab. 1 Physical and chemical properties of anthracite
验开始前采集无烟煤和细河沙，作为 J1 样品。每
and fine river sand
个运行周期结束后（即每 4 d）进行 1 次基质采
基质种类 粒径/mm 孔隙率/%
Substrates Particle size Porosity 集，分别作为 J2 样品和 J3 样品。样品采集后，分
无烟煤 别装入标记好的自封袋，每组采集 个平行样本，
Anthracite 4~6 48.8 3
细河沙 并在−80 ℃ 下冻存，以用于基质微生物分析。

River sand 1~3 44.0
1.4 分析方法

表 2 水平潜流人工湿地系统进水水质指标
1.4.1 DNA 的提取
Tab. 2 Inlet water quality indices of horizontal subsurface
DNA 提取方法采用 Omega Bio-tek（Norcross，
flow constructed wetland
GA，U.S.）的 DNA Kit，按照试剂盒说明书进行
亚硝 化学需
指标 总磷 总氮 氨态氮 硝态氮 操作。提取得到的 DNA 样品经过 1% 琼脂糖凝胶
Indices TP TN NH 4 + -N 态氮 NO 3 − -N 氧量
电泳和分光光度法（260 nm/280 nm
NO 2 − -N COD 光密度比）进
浓度/
（mg/L） 1.99±0.03 9.84±0.12 9.08±0.05 0.02 0.47±0.02 30.10 行质量检测。检测完成后，样品储存在−20 ℃ 以备
Concentration
后续实验使用。

表 3 潮汐流人工湿地系统进水水质指标
Tab. 3 Inlet water quality indices of tidal flow constructed wetland
指标 总磷 总氮 氨态氮 亚硝态氮 硝态氮 化学需氧量
Indices TP TN NH 4 + -N NO 2 − -N NO 3 − -N COD
浓度/（mg/L）
Concentration 2.03±0.02 10.60±0.29 11.21±0.05 0.01 0.85±0.13 29.91±0.32

1.4.2 16S rDNA 基因片段的扩增 应体系的总量为 25.0 μL，具体组成如下：12.5 μL
细菌 16S rDNA V3~V4 扩增所用引物为 338F KAPA 2G Robust Hot Start Ready Mix、 1.0 μL 正
（ 5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3'） 和 806R 向引物（浓度 5 μmol/L） 、1.0 μL 反向引物（浓度
（ 5'-GGACTACNNGGGTATCTAAT-3'） 。 PCR 反 5 μmol/L） 、5.0 μL DNA（总 DNA 量为 30 ng） ，